[发明专利]一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法

权利要求书

1.一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：以茅苍术或茅苍术粗提取物为原料采用细胞膜色谱法提取活性成分。

2.根据权利要求1所述一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，还包括将以茅苍术为原料采用细胞膜色谱法提取的活性成分进行检测的步骤，检测的步骤包括高效液相检测和/或质谱检测。

3.根据权利要求2所述一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，高效液相检测的条件包括：采用C18柱，流动相为甲醇和水，检测波长为203nm，柱温为30℃，流速为1.0ml/min；和/或质谱检测的条件包括：电离方式EI，电子能量70eV，离子源温度230℃，四极杆温度150℃，调谐方式为标准调谐，扫描范围为10-500amu，电子倍增器电压1341V。

4.根据权利要求1-3任一项所述一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，以茅苍术或茅苍术粗提取物为原料采用细胞膜色谱法提取活性成分包括以下步骤：用乳腺癌细胞制备细胞膜色谱柱，加入茅苍术粗提取物，使用去离子水洗涤，随后采用pH3.3的50％甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱液。

5.根据权利要求1-3任一项所述一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，在细胞膜色谱法中，细胞膜色谱柱的装柱方法为湿法装柱法，包括以下步骤：将细胞膜悬液测定蛋白含量，按蛋白含量：硅胶粉10mg：1g的比例，向细胞膜悬液中加入硅胶粉，搅拌均匀后静置过夜，湿法装柱得到用于筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的色谱柱。

6.根据权利要求1-3任一项所述一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，在细胞膜色谱法中，采用的细胞膜为乳腺癌细胞的细胞膜，优选的，采用的细胞膜为乳腺癌细胞MCF-7的细胞膜。

7.根据权利要求1-3任一项所述一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，细胞膜色谱法中，细胞膜的制备方法包括以下步骤：收集细胞悬液1000g 4℃离心10min，弃上清，得到细胞沉淀；生理盐水清洗细胞沉淀2-3遍，加入50mM Tris-Hcl，超声30min破碎细胞；将悬液于1000g 4℃离心5min，细胞膜悬浮在上清液中，收集上清液于12000g 4℃离心20min，所得沉淀即为细胞膜。

8.根据权利要求1-3任一项所述一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，茅苍术粗提取物为茅苍术的乙醇提取物；粗提取物与细胞膜色谱法过程中使用的细胞膜的蛋白含量的质量比为1g：10mg。

9.根据权利要求8所述一种靶向筛选茅苍术抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，茅苍术的粗提取物的制备方法包括以下步骤：取茅苍术干燥根茎，打粉后过40目筛，用10倍量的90％乙醇，50℃超声提取多次，每次40分钟，提取液抽滤后混合，浓缩获得浸膏，即为茅苍术的粗提取物。

10.茅苍术活性成分在制备预防和/或治疗乳腺癌药物中的应用，其特征在于，茅苍术活性成分采用权利要求1-9任一项所述方法制备。