[发明专利]一种个体化肿瘤治疗性疫苗及其制备方法

说明书

本发明涉及生物医药领域，为提高肿瘤患者个体化治疗的效果，提供一种个体化肿瘤治疗性疫苗及其制备方法。通过对比受试者肿瘤组织和正常组织获得个体化的肿瘤新抗原组，合成肿瘤新抗原肽组，将肿瘤新抗原肽组与佐剂制备抗肿瘤疫苗，所述的佐剂包括Poly(IC:LC)、STING激动剂。由Poly(IC:LC)、STING激动剂组成的佐剂能够有效激活机体产生针对肿瘤异常表达的、由MHC I类限制性表位肽和MHCII类限制性表位肽组成的肿瘤新抗原肽组的CD4+细胞免疫应答和CD8+细胞免疫应答，从而显著抑制肿瘤生长，并且不产生明显不良反应。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种个体化肿瘤治疗性疫苗及其制备方法，特别涉及肿瘤新抗原表位肽与Poly(IC:LC)、干扰素基因刺激蛋白STING激动剂联合在抗肿瘤中的应用。

背景技术

恶性肿瘤是威胁人类健康的重大疾病，其发病率逐年增高，是当前医学研究领域所面临的重大挑战。近几年来，肿瘤免疫治疗的研究得到突破性进展。肿瘤免疫治疗形式多样包括肿瘤靶向抗体、免疫系统调节抗体、肿瘤疫苗、过继免疫细胞疗法等。

治疗性疫苗从诞生到现在已有200多年的历史，目前虽不能完全代替药物，但已成为疾病治疗的辅助手段。治疗性疫苗目的在于诱导抗原特异的T细胞反应，能杀伤肿瘤细胞或感染有病原体的病态细胞。利用抗原增强机体的特异免疫应答，尤其是细胞免疫应答，是治疗性疫苗的发展方向，其目标是使特异性抗原具有免疫原性及免疫反应性，产生保护性细胞免疫应答。特异性抗原如何顺利被抗原提呈细胞摄取，以及如何突破机体对它的低反应性，成为治疗性疫苗亟待解决的问题。

肿瘤细胞和正常细胞的区别可以用千差万别来形容，包括增殖能力，异常表达多种不同的基因等等。但是最根本的不同还是由于肿瘤细胞的突变，正是由于这些突变造成了肿瘤细胞的增殖能力大增、躲避免疫系统的监控等等。突变是肿瘤细胞和正常细胞一个非常本质的不同之处，即肿瘤细胞中突变的基因表达出来的产物比如一段肽链肯定与不突变的是不一样的，而一些突变经过MHC被呈递到肿瘤细胞表面，进而被T细胞的TCR特异性识别，从而直接杀伤肿瘤细胞，这样的突变肽段就被称为新抗原“neoantigen”。新抗原代表着肿瘤治疗的有效靶点，正在发展成为一种全新的治疗癌症的方法。由于在体内能够识别这些新抗原的T细胞比较稀少，或者是肿瘤细胞通过免疫逃避机制逃避了特异性T细胞的杀伤，因而，我们可以在体外通过多肽合成技术合成这些突变的肽段，然后注射到人体中，刺激机体特异性识别这类新抗原的T细胞大量在体内增殖，从而达到特异性杀伤携带这类新抗原的肿瘤细胞的目的。

由于肿瘤治疗性疫苗采用的免疫原来源于肿瘤细胞，其与正常细胞中的野生型蛋白相比结构高度相似，免疫原性小；并且，为了避免引入其它免疫原性组份带来安全性风险，作为肿瘤治疗性疫苗的免疫原通常分子较小，无法形成相对受试者而言的完整免疫原。进而，治疗性疫苗在抗原诱导产生疾病之后接种，接种对象是慢性疾病患者，其免疫应答常处于低下水平，如何突破免疫耐受、增强机体的免疫应答、提高疫苗的有效性是疫苗研究的核心和难点问题。

此外，由于肿瘤发病机制和临床表现的多样性，即使临床上属于同一类型的肿瘤在不同患者之间也存在着巨大的差异，肿瘤的多样性和不同患者之间的差异导致了现有治疗性疫苗治疗效果不稳定的缺点，具体表现为肿瘤治疗性疫苗在极少数个体中疗效较好、但在大多数情况下疗效很差甚至完全无效，严重阻碍了肿瘤治疗性疫苗的技术发展和应用。

为了解决肿瘤治疗性疫苗免疫原性差、效果不稳定等问题，现有技术主要从寻找新的免疫原性强的肿瘤特异性多肽、改造已有的肿瘤相关肽(例如通过连接载体、结构改造、融合表达、分子模拟等手段)、组合使用多种肿瘤相关肽、添加佐剂等。然而，上述技术路线无法根本解决技术问题反而因引入了更多种免疫原而稀释了有效免疫原作用，同时引入了更多无效免疫原和佐剂也带来更高的安全性隐患。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明提出了肿瘤个体化治疗的思路，并且提供了适合产业推广的肿瘤个体化治疗方案。