[发明专利]含有还原剂的毛细管凝胶电泳检测试剂盒在审
申请号: | 202110469256.7 | 申请日: | 2021-04-28 |
公开(公告)号: | CN113189183A | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 方伟杰;沈斌彬;张中伟 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447;G01N33/68 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 郑海峰 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 含有 还原剂 毛细管 凝胶电泳 检测 试剂盒 | ||
1.一种含有还原剂的毛细管凝胶电泳检测试剂盒,其特征在于,所述样品缓冲液中含有至少一种还原剂;所述的还原剂选自11-巯基-1-十一醇、2,2’-(1,2-乙二基双氧代)双乙硫醇或双巯基乙酸乙二醇酯中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述样品缓冲液中游离巯基的浓度为0.07-700mM,优选0.7-70mM,更优选7-70mM。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述样品缓冲液选自Tris缓冲液或者磷酸盐缓冲液,所述样品缓冲液的pH值在3.0-10.0之间,优选的,所述样品缓冲液选自Tris-HCl缓冲液或者磷酸盐-柠檬酸缓冲液,pH值在6.5-10.0之间。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述样品缓冲液选自pH 9.0的Tris-HCl缓冲液或pH 6.5的磷酸盐-柠檬酸缓冲液。
5.根据权利要求1-4任一项所述的样试剂盒,其特征在于,所述样品缓冲液进一步含有十二烷基硫酸钠,其含量在0.1-5%(w/w)之间,优选0.5-2%(w/w),更优选1%(w/w)。
6.根据权利要求1-4任一项所述的试剂盒,其特征在于,所述样品缓冲液含有如下组分:
(1)Tris-HCl缓冲液100mM;
(2)十二烷基硫酸钠1%(w/w);
(3)选自11-巯基-1-十一醇、2,2’-(1,2-乙二基双氧代)双乙硫醇或双巯基乙酸乙二醇酯中的一种或多种的还原剂,其总游离巯基的浓度为7mM;
pH值为9.0。
7.根据权利要求1-6任一项所述的试剂盒,其特征在于,所述样品缓冲液含有如下组分:
(1)磷酸盐-柠檬酸缓冲液20mM;
(2)十二烷基硫酸钠1%(w/w);
(3)选自11-巯基-1-十一醇、2,2’-(1,2-乙二基双氧代)双乙硫醇或双巯基乙酸乙二醇酯中的一种或多种的还原剂,其总游离巯基的浓度为7 0mM;
pH值为6.5。
8.一种制备权利要求6所述试剂盒中的样品缓冲液的方法,其特征在于,所述方法包括:
将处方量的Tris缓冲盐,处方量的十二烷基硫酸钠和处方量的还原剂溶解在去离子水中,用盐酸调节pH至9.0,接着用去离子水定容至50mL,得到样品缓冲液。
9.一种制备权利要求7所述试剂盒中的样品缓冲液的方法,其特征在于,所述方法包括:
将处方量的磷酸盐,处方量的十二烷基硫酸钠和处方量的还原剂溶解在适量的去离子水中,用柠檬酸调节pH至6.5,接着用去离子水定容至50mL,得到样品缓冲液。
10.权利要求1-9任一项所述的试剂盒对蛋白样品进行还原型CE-SDS检测的应用,其中,所述蛋白样品选自重组抗蓖麻毒素人源化单克隆抗体(mAb1)、重组抗HER2人源化单克隆抗体(mAb2)、T-DM1(ADC)和注射用重组人II型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(Fusionprotein)。
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