[发明专利]一种抗原谱拓展O型口蹄疫病毒株及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 202110479816.7 | 申请日： | 2021-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN113061587B | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 李平花;刘在新;卢曾军;黄书伦;查晶晶;李冬;白兴文;孙普;马雪青;曹轶梅;付元芳;李坤;袁红;张婧 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/42;C12N15/85;A61K39/135;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 薛红凡 |
| 地址： | 730046 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 抗原 拓展 口蹄疫病毒 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种抗原谱拓展O型口蹄疫病毒株rHN/NXVP1/G-H，其特征在于，以重组口蹄疫病毒rHN/NXVP1为骨架，嵌合了口蹄疫疫苗株O/HB/HK/99的G-H环抗原表位基因；所述rHN/NXVP1重组病毒是在O/HN/CHA/93毒株的基础上，嵌合了O/NXYCh/CHA/2018的VP1基因所得；
嵌合有疫苗毒株O/HB/HK/99 G-H环基因的O/NXYCh/CHA/2018的VP1基因编码的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.根据权利要求1所述抗原谱拓展O型口蹄疫病毒株rHN/NXVP1/G-H，其特征在于，所述嵌合有疫苗毒株O/HB/HK/99 G-H环基因的O/NXYCh/CHA/2018的VP1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.权利要求1或2所述抗原谱拓展O型口蹄疫病毒株rHN/NXVP1/G-H的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）以半长质粒pSK-Z123为骨架，人工合成含O/NXYCh/CHA/2018的VP1基因并嵌合疫苗毒株O/HB/HK/99 G-H环基因的重组质粒，记为重组质粒pSK-Z123NXVP1G-H；
2）将步骤1）中所述重组质粒pSK-Z123NXVP1G-H用
3）将步骤2）中所述重组质粒pOFS-NXVP1/G-H转染细胞，拯救病毒，得到rHN/NXVP1/G-H。
4.根据权利要求3所述构建方法，其特征在于，步骤2）中嵌合有疫苗毒株O/HB/HK/99G-H环基因的O/NXYCh/CHA/2018的VP1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
5.根据权利要求3所述构建方法，其特征在于，步骤2）中
10× Buffer H 10 μL、
6.根据权利要求3所述构建方法，其特征在于，步骤3）中在所述转染细胞前，对所述重组质粒pOFS-NXVP1/G-H进行鉴定；
所述鉴定的方法采用
7.权利要求1或2所述抗原谱拓展O型口蹄疫病毒株rHN/NXVP1/G-H或权利要求3~6中任意一项所述构建方法构建得到的O型口蹄疫病毒株rHN/NXVP1/G-H在制备抗原广谱O型口蹄疫疫苗中的应用。
8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，所述抗原广谱O型口蹄疫疫苗的防控对象为PanAsia谱系、Mya98谱系、Ind-2001谱系和/或Cathay谱系病毒株。
9.一种抗原广谱O型口蹄疫疫苗，其特征在于，包括权利要求1或2所述抗原谱拓展O型口蹄疫病毒株rHN/NXVP1/G-H或权利要求3~6中任意一项所述构建方法构建得到的O型口蹄疫病毒株rHN/NXVP1/G-H。
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