[发明专利]中药材中黄曲霉毒素B1的测定方法

说明书

本发明涉及中药材中黄曲霉毒素B₁的测定方法，其特征在于：包括，样品选取：将200g中药材用粉碎研磨机粉碎至粉末状，使其粒径小于2mm试验筛，混合均匀后缩分至50g，储存于样品瓶中，密闭保存，供检测使用；称取1g中药材试样于50mL离心管中，加入20mL的50％甲醇水溶液，涡旋提取3分钟，4000r/min离心5分钟，上清液备用；试纸条选取：从包装中取出黄曲霉毒素B₁免疫荧光试纸条，至于孵育器内，25℃恒温孵育5分钟，待用；取液：准确移取样品选取中试样上清液1.00mL至5mL离心管中，再准确加入溶液稀释剂1.00mL，涡旋混匀；滴入试纸条：移取取液操作中的试样稀释液100μL至试纸条微孔内，继续孵育10分钟；本发明具有检测准确、效率高、准确定量和精密度高的优点。

技术领域

本发明涉及黄曲霉毒素B₁测定的技术领域，具体涉及中药材中黄曲霉毒素B₁的测定方法。

背景技术

黄曲霉毒素是一类主要由黄曲霉菌和寄生曲霉菌分泌产生的剧毒代谢产物，是迄今发现的最强致癌物质之一。黄曲霉毒素目前已发现20余种，主要包括黄曲霉毒素B₁(AFB1)、B₂(AFB2)、G₁(AFG1)、G₂(AFG2)和M₁(AFM1)等，其中AFB1的毒性最强，污染最为广泛，它的毒性是氰化钾的10倍，砒霜的68倍。早在1993年，黄曲霉毒素B1被世界卫生组织的癌症研究机构划定为已知最强致癌化学物质之一，即Ⅰ类致癌物质。产毒真菌菌株广泛存在于自然界中，谷物、水果、中药、茶叶、食用油和牛奶等农产品和食品均易受黄曲霉毒素B1的污染。我国属于黄曲霉毒素污染较重的地区，特别是南方高温高湿地区受污染的情况最为严重。因此加强黄曲霉毒素的检测、特别是速测，及时了解和掌握各种食物及农产品的卫生信息，对保障我国食品消费安全具有重要意义。

现有黄曲霉毒素的检测方法主要是精密仪器分析法和免疫学分析法。其中精密仪器分析法主要包括高效液相色谱法、色谱-质谱联用，这些方法灵敏度高，准确性好，然而存在仪器昂贵，要求黄曲霉毒素样品纯化程度高，传统的样品前处理技术过程繁琐，耗时长，对实验环境要求高等不足，难以实现快速检测的目的。

近年来迅速发展的免疫层析分析方法克服了上述方法的不足，作为一类新型的快速检测分析技术，具有简便快速的操作过程、即刻呈现测试结果、价格低廉等优点，已经被广泛应用于医学诊断、食品检测等各个领域。

经过检索可知，专利号为CN201710753370.6，专利名称为一种检测黄曲霉毒素B₁的时间分辨荧光试纸条及其应用的公开材料，在该公开材料中，公开了一种黄曲霉毒素B1时间分辨荧光试纸条，该试纸条包括样品吸收垫、反应膜以及吸水垫三部分。反应膜位于中间，样品吸收垫与吸水垫分别搭接于反应膜左右两端。其中，样品吸收垫上设有加样区和微球区，微球区上载有时间分辨荧光微球；反应膜上设有检测线(T线)和质控线(C线)，T线接上包被黄曲霉毒素B1抗原，C线包被抗兔抗体，并公开了试纸条的制备和使用方法，通过分析可知，检测方法的操作过于复杂，精密度差，，不能准确定量，且准确性较差。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，而提供一种检测准确、效率高、准确定量和精密度高的药材中黄曲霉毒素B₁的测定方法。

本发明的目的是这样实现的：中药材中黄曲霉毒素B₁的测定方法，其特征在于：包括，

样品选取：将200g中药材用粉碎研磨机粉碎至粉末状，使其粒径小于2mm试验筛，混合均匀后缩分至50g，储存于样品瓶中，密闭保存，供检测使用；称取1g中药材试样于50mL离心管中，加入20mL的50％甲醇水溶液，涡旋提取3分钟，4000r/min离心5分钟，上清液备用；

试纸条选取：从包装中取出黄曲霉毒素B₁免疫荧光试纸条，至于孵育器内，25℃恒温孵育5分钟，待用；