[发明专利]肺结核病变活动性标志物、试剂盒、方法及模型构建方法

说明书

本发明涉及肺结核病变活动性标志物、试剂盒、方法及模型构建方法，其特征在于，肺结核病变活动性标志物为血液样本中的血浆蛋白生物标志物，血浆蛋白生物标志物为包括C1QB蛋白质和CCL19(MIP3B)蛋白质的一种或多种的联合标志物；发明首次采用C1QB和CCL19(MIP3B)这一组合联合标志物作为肺结核病变活动性检测的生物标记物，构建了肺结核病变活动性检测的快速诊断模型，为结核病的临床诊断提供了新的方向，作为肺结核病变活动性诊断的一种技术构思，为活动性肺结核的诊断提供新的靶点；因此，本发明克服了现有活动性肺结核的诊断检出率低、耗时长等缺点，具有特异性好、灵敏度高的特点，对肺结核病变活动性的辅助诊断有良好的临床应用价值。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，更具体地，涉及C1QB和CCL19(MIP3B)作为肺结核病变活动性诊断标志物、试剂盒、检测方法以及模型构建方法。

背景技术

在全球，结核病是十大死亡原因之一，也是单一传染源的主要死因。肺结核是由结核分枝杆菌感染引起的一种慢性传染性疾病。2019年，全世界估计有1000万人患有结核病。结核病的诊断试验包括痰涂片显微镜检查(100多年前开发)、快速分子试验(2010年WHO首次批准)和基于培养的方法，痰涂片检查只在约50-60％的肺结核患者中发现抗酸杆菌，而培养则需要长达8周才能提供结果，但二者仍是参考金标准。如果诊断不明确，未能进行及时有效的抗结核治疗，结核病的死亡率会很高。

WHO，2020年全球结核病报告显示，菌阴性肺结核患者与菌阳性肺结核患者的相对传播率为22％，而中国至少有30％的结核病病例是由痰涂片阴性结核病传播的。据日本的研究显示，术前培养阴性的患者中有73％在其病灶中检测不到活的结核分枝杆菌。部分结核患者包括菌阴性结核病抗结核治疗结束后，肺部仍有持续性炎症。这些炎性反应不仅对肺结核感染控制无效，反而会加剧疾病，引起结核病复发和传染。18-氟代脱氧葡萄糖(fluorine-18fluorodeoxyglucose，18F-FDG)摄取反映细胞内糖酵解，在结核、其他肉芽肿炎症、肿瘤细胞中均增高。18F-FDG高摄取与疾病活动程度有较高的相关性。目前可用18F-FDG PET/CT评价菌阴性肺结核的病变活动性。然而，18F-FDG-PET/CT成本高并且涉及辐射暴露，而且对于定性病变诊断常常缺乏特异性，常常不能可靠地区分结核病变与恶性肿瘤。因此，寻找一种可替代PET-CT的生物标志物来评估肺结核病灶活动性非常重要。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的肺结核病变活动性诊断标志物特异性不好，灵敏度不高，且检测耗时的问题，提供C1QB和CCL19(MIP3B)这一组合作为肺结核病变活动性诊断的一种技术构思，为活动性肺结核的诊断提供新的靶点，并且对活动性肺结核诊断有良好的临床应用价值。

具体地，本发明一方面提供了选择性地检测一种C1QB和CCL19(MIP3B)的试剂组合标志物在制备快速诊断肺结核病变活动性的试剂盒中的用途，所述试剂用于测定得自所述受试者的血浆中C1QB和CCL19(MIP3B)的水平，其中所述C1QB的水平相对于正常人受试者的水平的升高，CCL19(MIP3B)的水平相对于正常人受试者的水平的降低指示所述受试者中存在活动性肺结核。

一种肺结核病变活动性标志物，其特征在于，为血液样本中的血浆蛋白生物标志物，所述血浆蛋白生物标志物为包括C1QB蛋白质、CCL19蛋白质或MIP3B蛋白质的一种或多种的联合标志物。

进一步地，所述联合标志物中CCL19蛋白质或MIP3B蛋白质的氨基酸序列如SEQ IDNO:2所示，核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

进一步地，所述联合标志物中C1QB蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示，核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。