[发明专利]一种酶解桑叶蛋白制备ACE抑制肽的方法有效
| 申请号： | 202110493868.X | 申请日： | 2021-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN113215214B | 公开（公告）日： | 2022-09-13 |
| 发明（设计）人： | 贾漫丽;范伟;李娜;王彬彬;李季生;杨雪 | 申请（专利权）人： | 承德医学院 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 李海霞 |
| 地址： | 067000*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 桑叶 蛋白 制备 ace 抑制 方法 | ||
1.一种酶解桑叶蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）取新鲜桑叶干燥粉碎成桑叶粉，按照料液比1:20加入蒸馏水混合均匀，进行超声波提取，得混悬液；
（2）将混悬液离心分离，得上清液；上清液加入HCl调节pH至3.5，再次离心分离得沉淀蛋白；
（3）将沉淀蛋白重新悬浮于蒸馏水中，调节pH至7.0，再次离心分离，得沉淀，冷冻干燥后得桑叶蛋白粉，于-20℃下贮存备用；
（4）取桑叶蛋白粉，加入蒸馏水配置成酶解底物，水浴恒温60℃下混合均匀，调节pH至7，再加入酶解底物质量7.5%的酶，酶解90min；
（5）酶解完成后，立即置于沸水中灭酶，灭酶后冷却得酶解液；
（6）将酶解液离心分离后，得上清液，即为ACE抑制肽；
其中，步骤（4）酶解底物浓度为20g/L；
步骤（1）中超声波功率为400W，超声时间为40min；
步骤（4）所加入的酶为芽孢杆菌蛋白酶。
2.根据权利要求1所述酶解桑叶蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，步骤（2）离心分离的时间为6min，转速为5000r/min；HCl的浓度为1.0mol/L。
3.根据权利要求1所述酶解桑叶蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，步骤（4）调节pH使用0.5 mol/L的NaOH或0.5 mol/L的HCl。
4.根据权利要求1所述酶解桑叶蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，步骤（5）沸水灭酶时间为10min。
5.根据权利要求1所述酶解桑叶蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，步骤（6）离心分离的转速为10000 r/min，离心时间为10min，温度控制在4℃。
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