[发明专利]用于检测肠癌的miRNA标记物及其应用

权利要求书

1.一种用于检测结直肠癌的miRNA标记物，其特征在于：所述的miRNA标记物由miR-10a-3p和miR-374a-5p组成，或由miR-10a-3p、miR-374a-5p和miR-126-3p组成，或由miR-10a-3p、miR-374a-5p和miR-379a-5p组成，或由miR-10a-3p、miR-374a-5p、miR-126-3p和miR-379a-5p组成；

各miRNA的序列如下：

miR-10a-3p：CAAAUUCGUAUCUAGGGGAAUA，

miR-374a-5p：UUAUAAUACAACCUGAUAAGUG，

miR-126-3p：UCGUACCGUGAGUAAUAAUGCG，

miR-379a-5p：UGGUAGACUAUGGAACGUAGG。

2.权利要求1所述的miRNA标记物在制备结直肠癌诊断试剂或结直肠癌诊断试剂盒中的应用。

3.一种结直肠癌诊断试剂，其特征在于：为检测权利要求1所述的miRNA标记物表达水平的试剂。

4.根据权利要求3所述的结直肠癌诊断试剂，其特征在于：所述的试剂选自引物、探针、测序文库、芯片或其组合。

5.根据权利要求3所述的结直肠癌诊断试剂，其特征在于：所述的试剂包括引物和探针。

6.根据权利要求5所述的结直肠癌诊断试剂，其特征在于：所述的试剂包括检测miRNA的反转录引物、检测miRNA反转录所形成DNA的上游引物、扩增miRNA反转录所形成DNA的通用下游引物、扩增miRNA反转录所形成DNA的探针；其中，反转录引物为发卡状的茎环结构，茎环结构的3’端为一段Flap序列，Flap序列与miRNA互补结合。

7.根据权利要求6所述的结直肠癌诊断试剂，其特征在于：各引物、探针的序列如下：

miR-10a-3p的反转录引物：GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACTATTCC；

miR-10a-3p的上游引物：CGTATCTAGGGGAATAGTCG；

miR-374a-5p的反转录引物：GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCACTTA；

miR-374a-5p的上游引物：ATACAACCTGATAAGTGGTCGTATC；

miR-126-3p的反转录引物：GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCGCATT；

miR-126-3p的上游引物：CGTGAGTAATAATGCGGTCG；

miR-379a-5p的反转录引物：GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCCTACG；

miR-379a-5p的上游引物：ACTATGGAACGTAGGGGTCG；

通用下游引物：GTCGTATCCAGTGCAGGG；

探针：TCCGAGGTATTCGCACT。

8.一种结直肠癌诊断试剂盒，其特征在于：包含权利要求3-7任一项所述的结直肠癌诊断试剂。

9.根据权利要求3-7任一项所述的结直肠癌诊断试剂或权利要求8所述的结直肠癌诊断试剂盒，其特征在于：检测样本包括粪便、组织、血清和血浆。