[发明专利]一种miRNA的检测方法以及用于检测miRNA的侧流层析试纸条

权利要求书

1.一种肉类miRNA的检测方法，其特征在于，包括：针对待检测的miRNA，设计合成互补DNA单链；基于所述miRNA与DNA单链形成DNA-miRNA杂交复合物，采用免疫层析的方式进行检测；

所述miRNA为肉类种属特异性且稳定表达的miRNA；所述miRNA为羊肉和/或鸭肉的miRNA；当所述miRNA为羊肉的miRNA时，其序列为SEQ ID No. 1所示；当所述miRNA为鸭肉的miRNA时，其序列为SEQ ID No. 2所示。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述免疫层析包括胶体金免疫层析和荧光免疫层析中的任一种。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述荧光免疫层析包括荧光素免疫层析和量子点免疫层析。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测采用侧流层析试纸进行。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，将设计合成的带有荧光素或胶体金标记的生物素化DNA单链直接固定在试纸的结合垫上，所述试纸的检测线T线上包被有识别RNA-DNA杂交复合物的抗体，质控线C线上包被有链霉亲和素。

6.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，将胶体金或荧光标记的S9.6抗体直接固定在试纸的结合垫上，所述试纸的检测线T线上包被有识别RNA-DNA杂交复合物的抗体，质控线C线上包被有抗鼠IgG。

7.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述识别RNA-DNA杂交复合物的抗体为小鼠单克隆抗体S9.6；

所述荧光素包括异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明、荧光素Cy5中的任一种。

8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，使设计的DNA单链探针与所述miRNA形成杂交复合物后，采用侧流层析试纸条进行检测。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，采用侧流层析试纸条进行检测时，当试纸条出现两条条带，一条位于质控区内，一条位于检测区，则结果为阳性，表明样本中含有待检测的miRNA；当试纸条只有质控区出现一条条带，检测区没有条带，则结果是阴性，表明样本中不含有待检测的miRNA。

10.一种用于检测miRNA的侧流层析试纸条，其特征在于，所述试纸条包括样品垫、结合垫、NC膜、底板、检测线T线、质控线C线和吸水垫；所述试纸条的结合垫上固定有针对待检测miRNA设计合成的胶体金或荧光标记的生物素化DNA单链探针或胶体金或荧光标记的小鼠单克隆抗体S9.6；

所述miRNA为肉类种属特异性且稳定表达的miRNA；所述miRNA为羊肉和/或鸭肉的miRNA；当所述miRNA为羊肉的miRNA时，其序列为SEQ ID No. 1所示；当所述miRNA为鸭肉的miRNA时，其序列为SEQ ID No. 2所示。