[发明专利]多种维生素D代谢物联合检测方法及其检测试剂盒和应用

说明书

本发明涉及分析检测技术领域，具体涉及多种维生素D代谢物联合检测方法及其检测试剂盒和应用。本发明提供的检测维生素D代谢物的方法为采用液相色谱串联质谱法进行检测，其中，液相色谱的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为含有醋酸锂的水溶液，所述流动相B为含有醋酸锂的甲醇溶液。该方法可实现25OHD₃、25OHD₂、1,25(OH)₂D₃、1,25(OH)₂D₂、24,25(OH)₂D₃、24,25(OH)₂D₂的同时检测，可同时区分多种同分异构体和干扰；具有较高的灵敏度和特异性，且不需要衍生化处理，节约样本前处理时间，为维生素D代谢物的高通量检测提供便利。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，具体涉及多种维生素D代谢物联合检测方法及其检测试剂盒和应用。

背景技术

维生素D(vitaminD)是一种人体必须的脂溶性、类固醇类维生素，维生素D2(麦角钙化醇)和维生素D3(胆钙化醇)是维生素D家族成员中最重要的成员，具有广泛的生理代谢活性。维生素D经过肝脏和肾脏代谢，会产生一系列代谢物，其中包括25-羟基维生素D3、25-羟基维生素D₂、1,25二羟基维生素D₃、1,25二羟基维生素D₂、24,25二羟基维生素D₃、24,25二羟基维生素D₂等。

维生素D代谢物在体内的含量较低，且不同代谢物在结构、性质方面较为相似，且存在不同的同分异构体，这使得实现多种维生素D代谢物的同时有效检测存在较大难度。现有技术中的多数检测方法或依赖样品衍生，或仅能够实现个别代谢物的检测。因此，建立同时检测多种维生素代谢物、且具有较高特异性和灵敏度的检测方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供维生素D代谢物的检测方法，该方法能够同时检测25-羟基维生素D₃、25-羟基维生素D₂、1,25二羟基维生素D₃、1,25二羟基维生素D₂、24,25二羟基维生素D₃、24,25二羟基维生素D₂这六种维生素代谢物。本发明的另一目的是提供基于该方法的检测试剂盒及其应用。

具体地，本发明提供以下技术方案：

第一方面，本发明提供检测维生素D代谢物的方法，该方法采用液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)进行检测，其中，液相色谱的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为含有醋酸锂的水溶液，所述流动相B为含有醋酸锂的甲醇溶液。

优选地，所述流动相A和所述流动相B中，醋酸锂的浓度为0.18-0.22mM。

进一步优选地，所述流动相A和所述流动相B中，醋酸锂的浓度为0.2mM。