[发明专利]磷脂酶C突变体、制备方法及其应用有效
| 申请号： | 202110509125.7 | 申请日： | 2021-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN113215130B | 公开（公告）日： | 2022-12-06 |
| 发明（设计）人： | 刘静雯;代鹏;李桂玲;张永辉 | 申请（专利权）人： | 集美大学 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/70 |
| 代理公司： | 厦门创象知识产权代理有限公司 35232 | 代理人： | 王凤玲;尤怀成 |
| 地址： | 361000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 磷脂酶 突变体 制备 方法 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种磷脂酶C突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.一种编码权利要求1所述的磷脂酶C突变体的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
3.一种获得权利要求1所述的磷脂酶C突变体的方法，其特征在于，包括：
（1）分析野生型磷脂酶C的B因子值，找出可能显著影响磷脂酶C稳定性的关键氨基酸残基；
（2）分析氨基酸残基的二级结构和结构域进行二次筛选，得候选突变体；
（3）通过短时分子动力学模拟分析候选突变体的结构稳定性，选取均方根偏差和总能量最低的突变体验证；
（4）将步骤（3）选出的突变体的基因克隆入原核表达载体中，构建重组载体；
（5）将所述重组载体转入宿主菌，诱导其表达并纯化蛋白，以获得磷脂酶C突变体。
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