[发明专利]一种酒糟为原料连续发酵生产益生菌饲料的方法

权利要求书

1.益生菌发酵饲料的制备方法，其特征在于，以酒糟为原料，包括以下步骤：

(1)好氧连续发酵

将好氧益生菌种子接入发酵罐中，接种量5％～10％，于25-42℃培养4-16h，开始连续放料和补料，稀释率为0.01h^-1～0.5h^-1，放料和补料速度等于稀释率乘以发酵罐体积；发酵过程中，发酵罐通气量为0.5～3VVm，控制pH 3.0～8.0，第N+1级连续发酵罐的罐体积、装液量为第N级罐体积、装液量的1～10倍，第N级和N+1级发酵罐之间为串联，N的取值为1、2、3、4或5；

所述好氧益生菌包括枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、酵母菌、霉菌；

发酵培养基是酒糟好氧培养基：酒糟10-200g/L，K₂HPO₄ 0.2-2g/L，NaH₂PO₄ 0.2-2g/L，NaCl 0.2-10g/L，淀粉5-30g/L，MgCl₂ 0.2-10g/L，硫酸锰0.01-1g/L，氯化钴0.01-1g/L，硫酸亚铁0.01-1g/L，硫酸锌0.01-1g/L，硫酸铵0.2-20g/L；

补料时采用的补料培养基为酒糟好氧培养基；

(2)厌氧连续发酵

将厌氧益生菌种子接入发酵罐中，接种量5％～10％，于25-42℃不通空气培养4-16h，开始连续放料和补料，稀释率为0.01～0.5，放料和补料速度为(0.01V～0.5V)h^-1；发酵过程中搅拌转速50～150r/min，控制pH 3.0～7.5，第N+1级连续发酵罐的罐体积、装液量为第N级罐体积、装液量的1～3倍；

所述厌氧益生菌包括：乳酸乳杆菌、植物乳杆菌、双歧杆菌、粪肠球菌、乳酸片球菌；

发酵培养基是酒糟厌氧培养基：酒糟10-200g/L，葡萄糖5-30g/L，K₂HPO₄ 0.2-2g/L，NaH₂PO₄ 0.2-2g/L，NaCl 0.2-10g/L，MgCl₂ 0.2-10g/L，硫酸锰0.01-1g/L，氯化钴0.01-1g/L，硫酸亚铁0.01-1g/L，硫酸锌0.01-1g/L，碳酸钙5-20g/L；

补料时采用的补料培养基为酒糟厌氧培养基；

(3)混合厌氧固体发酵

酒糟补料培养基：酒糟20-90％，葡萄糖0.5-3％，K₂HPO₄ 0.02-0.2％，NaH₂PO₄ 0.02-0.2％，NaCl 0.02-1％，MgCl₂ 0.20-1％，硫酸锰0.001-0.1％，氯化钴0.001-0.1％，硫酸亚铁0.001-0.1％，硫酸锌0.001-0.1％，碳酸钙0.5-2％；

好氧连续发酵和厌氧连续发酵的最后一级发酵罐的出料液以1:5～5:1的体积流速比混合流入到搅拌机中并添加酒糟补料培养基，搅拌均匀后分装；酒糟补料培养基补加速度是好氧连续和厌氧连续出料液的混合总流速的2～20倍；分装好的酒糟饲料放入20～42℃厌氧环境中继续发酵1～20天后在4～20℃环境中冷藏。

2.根据权利要求1所述的益生菌发酵饲料的制备方法，其特征在于，好氧益生菌接入摇瓶种子培养基中，于25-42℃摇床中100～250r/min培养8～24h，接入种子罐中25-42℃培养4～20h；所述种子培养基：葡萄糖5-30g/L，淀粉5-30g/L，酵母膏1-15g/L，蛋白胨0.5-10g/L，K₂HPO₄ 0.2-2g/L，NaH₂PO₄ 0.2-2g/L，NaCl 0.2-10g/L。