[发明专利]一种分子肽突变体有效
申请号: | 202110516304.3 | 申请日: | 2021-05-12 |
公开(公告)号: | CN113214369B | 公开(公告)日: | 2022-05-17 |
发明(设计)人: | 江凌;陈耀;朱丽英;刘伟;陈先焓;陈心怡 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C07K14/315 | 分类号: | C07K14/315;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12N15/31;C12N15/70 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人: | 徐蓓;尹妍 |
地址: | 211816 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分子 突变体 | ||
1.一种分子肽突变体,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.编码权利要求1所述分子肽突变体的基因。
3.权利要求1所述分子肽突变体的纯化方法,其特征在于,包括:
(1)将分子肽的基因导入载体构建重组质粒,重组质粒导入宿主菌;
(2)将含重组质粒的宿主菌培养至OD600=0.6-0.8,之后加入IPTG诱导;
(3)诱导结束后,取菌液离心后收集菌体,加入磷酸缓冲液重悬,超声破碎;
(4)破碎液超速离心后取上清液,纯化透析获取纯化蛋白。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述(1)中,载体选用pET-22b。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,载体连接的酶切位点为
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述(1)中,宿主菌为大肠杆菌
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述(2)中,含重组质粒的大肠杆菌在LB培养基中培养。
8.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述(4)中,上清液在Ni-NTA树脂中进行蛋白纯化。
9.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,纯化后的蛋白在3000 Da的透析袋中透析24-26 h。
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