[发明专利]一种分子肽突变体有效

专利信息
申请号: 202110516304.3 申请日: 2021-05-12
公开(公告)号: CN113214369B 公开(公告)日: 2022-05-17
发明(设计)人: 江凌;陈耀;朱丽英;刘伟;陈先焓;陈心怡 申请(专利权)人: 南京工业大学
主分类号: C07K14/315 分类号: C07K14/315;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12N15/31;C12N15/70
代理公司: 江苏致邦律师事务所 32230 代理人: 徐蓓;尹妍
地址: 211816 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 分子 突变体
【权利要求书】:

1.一种分子肽突变体,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.编码权利要求1所述分子肽突变体的基因。

3.权利要求1所述分子肽突变体的纯化方法,其特征在于,包括:

(1)将分子肽的基因导入载体构建重组质粒,重组质粒导入宿主菌;

(2)将含重组质粒的宿主菌培养至OD600=0.6-0.8,之后加入IPTG诱导;

(3)诱导结束后,取菌液离心后收集菌体,加入磷酸缓冲液重悬,超声破碎;

(4)破碎液超速离心后取上清液,纯化透析获取纯化蛋白。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述(1)中,载体选用pET-22b。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,载体连接的酶切位点为Nde I和Xho I。

6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述(1)中,宿主菌为大肠杆菌E. coliBL21(DE3)。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述(2)中,含重组质粒的大肠杆菌在LB培养基中培养。

8.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述(4)中,上清液在Ni-NTA树脂中进行蛋白纯化。

9.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,纯化后的蛋白在3000 Da的透析袋中透析24-26 h。

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