[发明专利]一种鹅星状病毒卵黄抗体及其制备方法

说明书

本发明基于在先分离得到的纯度和毒力较强的毒株鹅星状病毒N‑GoAstV‑190123，将其制成灭活疫苗，免疫蛋鸡获得了抗体浓度和中和指数较高的卵黄抗体溶液，并通过将其与保护剂混合，制备得到了稳定性较好的卵黄抗体冻干制剂，该卵黄抗体冻干制剂对于鹅星状病毒N‑GoAstV‑190123具有较好的保护效力，其被动保护期长达8天。

技术领域：

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鹅星状病毒卵黄抗体及其制备方法。

背景技术：

鹅星状病毒是禽星状病毒属成员，属于ＲNA病毒，鹅感染星状病毒后表现为腹泻、关节炎及生长障碍，发生较重的致死性肝炎、胆囊炎及肾炎等疾病。2~25日龄雏鹅发病率较高，15日龄以内雏鹅最易感，死亡率一般为15%~36%，最高可达50%。由于禽星状病毒可拥有多个宿主，能够水平、垂直、跨种传播；同时禽星状病毒基因重组、适应新宿主的能力和新型禽星状病毒强毒株的不断发现，使得感染禽星状病毒的禽群净化异常困难。此外，禽星状病毒较强的理化因子抵抗力，对被禽星状病毒污染的环境消毒十分困难。目前，针对禽星状病毒还没有市场化的特异性药物和疫苗，体外适宜增殖细胞系的缺乏，导致可防控禽星状病毒感染的弱毒或灭活疫苗相对较少，更未有商品化的鹅星状病毒疫苗类产品。卵黄抗体是指从免疫禽蛋中提取的针对特定抗原的抗体，当机体受到外来抗原刺激后，法氏囊内的B细胞分化成为浆细胞，分泌特异性抗体进入血液循环，当血液流经卵巢时，特异性抗体(主要是IgG)在卵细胞中逐渐蓄积，形成卵黄抗体。实验室条件下进行攻毒后治疗的试验表明：鹅星状病毒卵黄抗体对发病早期（个别鹅出现精神沉郁、采食量下降）的鹅有大于等于80%治愈率。

基于目前鹅星状病毒在养殖场不断蔓延，导致的经济损失越来越大，因而，亟需研制安全有效的疫苗以及预防和治疗鹅星状病毒用的卵黄抗体和药物等，以对鹅星状病毒疫情进行有效的控制，避免养殖业的经济损失。

发明内容：

为了解决现有技术中鹅星状病毒感染的治疗手段有限的问题，本发明旨在提供一种鹅星状病毒卵黄抗体及其制备方法，基于发明人分离得到的一株免疫原性良好的鹅星状病毒分离毒株，制备得到抗体效价高的卵黄抗体，能够有效的抵御强毒的攻击，形成有效的免疫保护。

为解决以上技术问题，本发明采用如下技术手段：

一种鹅星状病毒卵黄抗体，其特征在于，所述卵黄抗体是采用保藏编号为CCTCCNo：V202068的鹅星状病毒N-GoAstV-190123株制备的灭活疫苗作为抗原制备得到的。

所述鹅星状病毒N-GoAstV-190123株在中国典型培养物保藏中心CCTCC进行用于专利程序的培养物的保藏，其保存号为：CCTCC No：V202068，分类命名为鹅星状病毒N-GoAstV-190123株；保藏日期为2020年10月14日；保藏地址为：湖北省武汉市武汉大学保藏中心。

本发明所涉及的鹅星状病毒N-GoAstV-190123株已在2021年03月23日申请的发明专利申请中进行了详细记载，其申请号为202110306942.2，发明名称为“一株鹅星状病毒及其应用”，本发明中通过引用的方式，将该专利申请中公开的内容引入到本发明中。

本发明还涉及鹅星状病毒卵黄抗体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

步骤一，采用鹅星状病毒N-GoAstV-190123株制备的灭活疫苗作为免疫原对产蛋鸡进行免疫，收集高免蛋；

步骤二，将高免蛋的蛋壳消毒后，收集卵黄；

步骤三，从卵黄中提取鹅星状病毒卵黄抗体。

其中步骤一中的免疫的程序为：

（1）基础免疫：将鹅星状病毒N-GoAstV-190123株灭活疫苗皮下注射健康产蛋鸡，每羽注射灭活疫苗1.0mL；