[发明专利]一株球孢白僵菌B2660及其在全细胞生物催化苯甲酸合成对羟基苯甲酸中的应用有效
申请号: | 202110521571.X | 申请日: | 2021-05-13 |
公开(公告)号: | CN113151015B | 公开(公告)日: | 2022-10-21 |
发明(设计)人: | 王金华;高娃;刘宗求 | 申请(专利权)人: | 湖北工业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P7/42;C12R1/645 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 江慧 |
地址: | 430068 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一株球孢白僵菌 b2660 及其 细胞 生物 催化 苯甲酸 成对 羟基 中的 应用 | ||
1.一株球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660,其特征在于,所述球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660的保藏编号为:CCTCC NO:M2021337。
2.一种球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂,其特征在于,所述球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂包括:
将权利要求1所述的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660进行发酵获得的湿菌体;
或将所述湿菌体经喷雾干燥获得的干粉菌剂。
3.根据权利要求2所述的一种球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂,其特征在于,所述湿菌体的制备方法为:
将种子斜面培养基保存的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660接种至液体培养基中第一摇床培养,获得种子液;
将所述种子液接种至液体培养基中第二摇床培养,获得培养液;
将所述培养液进行第一离心获得离心沉淀物,后用生理盐水洗涤再重悬和第二离心,获得湿菌体。
4.根据权利要求3所述的一种球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂,其特征在于,所述种子斜面培养基的配方为:土豆200g/L,葡萄糖20g/L,琼脂20g/L,溶剂为自来水,自然pH,121℃灭菌20 min;所述液体培养基的配方为:葡萄糖40 g/L,酵母粉10 g/L,七水硫酸镁2 g/L,二水氯化钙1 g/L,磷酸氢二钾1.8 g/L,磷酸二氢钾0.75 g/L,溶剂为自来水,自然pH,121℃灭菌20 min。
5.根据权利要求3所述的一种球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂,其特征在于,所述第一摇床培养和第二摇床培养的条件均包括:摇床转速为100~300 rpm,培养温度为25~30℃,培养时间为24~96 h。
6.根据权利要求3所述的一种球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂,其特征在于,所述接种中,按体积比为1~5%的接种量接种。
7.根据权利要求3所述的一种球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂,其特征在于,所述第一离心和第二离心的条件均包括:转速为5000~10000 rpm,时间为5~15min。
8.一种权利要求1所述的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660或者权利要求2所述的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂在全细胞生物催化苯甲酸合成对羟基苯甲酸中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述应用包括:
采用权利要求2所述的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂为催化剂,以苯甲酸为底物,在温度为25~35℃,摇床转速为100~300 rpm的条件下进行生物转化反应,获得含对羟基苯甲酸的转化液。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述苯甲酸的终浓度为10~100 g/L,所述的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660发酵菌剂为将权利要求1所述的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B2660进行发酵获得的湿菌体时,所述湿菌体的加入量为5~40 g/L。
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