[发明专利]一种稻米淀粉粒间填充物的分离提取方法

说明书

本发明公开了一种稻米淀粉粒间填充物的分离提取方法，步骤为：1）取精米粉样品于锡纸包裹的烧杯中，加入AgNO₃溶液浸泡，得悬浊液；2）将悬浊液于避光条件下，进行磁力搅拌；3）然后与甘油混合，得混合液；4）混合液进行离心得一次沉淀物和上清液；5）一次沉淀物用无水乙醇洗涤，去除甘油，自然风干，即得淀粉粒；上清液与无水乙醇混合，继续离心，得二次沉淀物；6）二次沉淀物用无水乙醇洗涤，去除甘油，自然风干，即为淀粉粒间填充物的粗提物。本发明方法证实了分离淀粉粒间填充物的可行性，可有效分离淀粉粒及其粒填充物，分离的粒间填充物粗提物可用于研究淀粉粒与粒间填充物结构性质的比较，为解析其影响稻米品质的机理提供帮助。

技术领域

本发明属于稻米品质分析技术领域，具体涉及一种稻米淀粉粒间填充物的分离提取方法。

背景技术

稻米灌浆过程，随着淀粉粒数目和体积的不断增加，导致淀粉粒在空间上相互挤压，成熟后，绝大多数淀粉粒排布较为紧密，成规则的多面体型；仅有少数淀粉粒因挤压程度不够成圆球或椭球形。而蛋白体镶嵌在这些淀粉粒间，对淀粉粒的糊化具有抑制作用。

除了蛋白体外，淀粉粒间还存在一类碎屑类物质，填充在淀粉粒间，与淀粉粒结合紧密，在胚乳横断面扫描电镜中不能够被发现。另外，这类碎屑类物质极易被自身内源淀粉酶水解，这就导致在常规分离提取淀粉粒的过程中，由于其已被自身内源淀粉酶水解而难以发现、分离和获得这类物质。在添加淀粉酶抑制剂抑制内源淀粉水解作用下，搅拌能够促进淀粉颗粒分散，进而释放出淀粉颗粒间隙中的填充物，扫描电镜下能清晰观察到大量碎屑类物质存在，如图1所示。

由于前人对淀粉粒间填充物的研究尚未见报道，这些碎屑类填充物对稻米品质究竟有何影响，在蒸煮糊化过程中是否起到水热介质作用，尚不明确。因此，本发明在抑制水稻胚乳内源淀粉活性防止填充物被水解的前提下，利用甘油作为介质，根据粒径大小不同沉降速率不同的原理，设置合适的离心力，将淀粉粒间填充物与淀粉粒进行有效分离，得到淀粉粒间填充物的粗提物，为后续研究淀粉粒间填充物对稻米品质的影响奠定基础。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明设计的目的在于设计提供一种相对简便、有效的分离提取淀粉粒间填充物的技术方案。

本发明通过以下技术方案加以实现：

所述的一种稻米淀粉粒间填充物的分离提取方法，其特征在于包括 以下步骤：

1）称取适量的精米粉样品于烧杯中，加入AgNO₃溶液浸泡，浸泡期间锡纸包裹烧杯，并搅拌3-5次，制得悬浊液；锡纸包裹避光防止AgNO₃分解，以抑制内源淀粉水解淀粉粒间填充物；

2）将步骤1）制得的悬浊液于避光条件下，在磁力搅拌器上以300转/分的速度搅拌4-6h；

3）将经过步骤2）处理过的悬浊液与甘油混合，轻轻上下颠倒反复混匀，得混合液；

4）将步骤3）所得的混合液，置于落地离心机中的离心瓶中，于转速1200-2000g/min的条件下离心10min，得一次沉淀物和上清液；

5）分别收集步骤4）离心后的一次沉淀物和上清液，一次沉淀物用无水乙醇洗涤3-5次，去除甘油，自然条件下风干，即得淀粉粒；上清液用等体积的无水乙醇混合，轻轻上下颠倒反复混匀，置于落地离心机的离心瓶中，于转速3000g/min的条件下离心10min，收集沉淀物即得二次沉淀物；

6）将步骤5）收集到的二次沉淀物用无水乙醇洗涤3-5次，去除甘油，自然条件下风干，即为淀粉粒间填充物的粗提物。