[发明专利]一种ssDNA核酸适配体及其在识别、检测哈维氏弧菌中的应用有效
申请号: | 202110526322.X | 申请日: | 2021-05-14 |
公开(公告)号: | CN113278621B | 公开(公告)日: | 2022-10-28 |
发明(设计)人: | 李鹏飞;余庆;刘明珠;苏美珍;王浩;王高学;凌飞 | 申请(专利权)人: | 广西科学院 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;G01N33/569;G01N21/64 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 肖宇扬 |
地址: | 530007 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 ssdna 核酸 适配体 及其 识别 检测 哈维 弧菌 中的 应用 | ||
1.一种用于识别、检测哈维氏弧菌的ssDNA核酸适配体,其特征在于,所述ssDNA核酸适配体的核苷酸序列为5’-GACGCTTACTCAGGTGTGACTCGTGTAATGGGGGGGCTGGAAGGGGTTTGTGTTGGTTTGGTCGGAAGTTCCACGAAGGACGCAGATGAAGTCTC-3’。
2.根据权利要求1所述的ssDNA核酸适配体,其特征在于,所述ssDNA核酸适配体的核苷酸序列上结合有标记物。
3.根据权利要求2所述的ssDNA核酸适配体,其特征在于,所述标记物选自生物素、酶、发光基团中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述的ssDNA核酸适配体,其特征在于,所述发光基团选自异硫氰酸荧光素、羟基荧光素、羧基四甲基罗丹明中的一种或多种。
5.一种用于识别、检测哈维氏弧菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含有如权利要求1~4任一项所述的ssDNA核酸适配体。
6.一种应用如权利要求1所述ssDNA核酸适配体的荧光分子探针检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:对ssDNA核酸适配体进行羟基荧光素标记;
步骤2:取待测样品1-100mg与步骤1所得浓度为100-200nM的ssDNA核酸适配体混合,并在冰上孵育结合20-60min;离心去上清,清洗待测样品,用流式细胞仪进行检测。
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