[发明专利]用于模拟细胞内渗的Transwell小室及使用方法

权利要求书

1.一种用于模拟肿瘤细胞内渗的Transwell小室，其特征在于，所述用于模拟肿瘤细胞内渗的Transwell小室自上而下为小室B，小室A；小室B，小室A在使用前粘合为一；小室A、小室B的中间部分自上而下依次为肿瘤细胞、Matrigel、血管内皮细胞或淋巴管内皮细胞。

2.如权利要求1所述的用于模拟细胞内渗的Transwell小室，其特征在于，所述血管内皮细胞或淋巴管内皮细胞包括为人脐静脉内皮细胞HUVEC、人肺动脉内皮细胞HPAEC或人真皮淋巴管细胞HDLEC中的一种。

3.如权利要求1所述的用于模拟细胞内渗的Transwell小室，其特征在于，所述用于模拟细胞内渗的Transwell小室可拆分为A、B两个transwell小室；A室具有完整Transwell膜，膜上孔径为8um；B室无此膜。

4.一种应用如权利要求1～3任意一项所述的用于模拟细胞内渗的Transwell小室的用于模拟细胞内渗的Transwell小室的使用方法，其特征在于，所述用于模拟细胞内渗的Transwell小室需配合高度超过常规24孔板高度2倍的无菌密闭容器使用。

5.如权利要求4所述的用于模拟细胞内渗的Transwell小室的使用方法，其特征在于，所述用于模拟细胞内渗的Transwell小室的使用方法包括以下步骤：

步骤一，A室朝上，于A室中均匀平整铺入Matrigel并37℃静置使其凝固，以此模拟血管或淋巴管外基质；

步骤二，待Matrigel凝固后，于超净台中将小室翻转，B室朝上，均匀铺入内皮细胞；

步骤三，置于无菌密闭容器内，放置于细胞培养箱中培养过夜，待内皮细胞满度超过90％时，将此模型小室取出，拆分为两个独立小室，弃B室；

步骤四，将A室置于常规24孔细胞培养板中，向孔板中加入全血清培养基，A室中加入无血清培养基稀释的肿瘤细胞，即可模拟肿瘤细胞进入淋巴或血管时先后穿过基质和内皮的过程。

6.一种模拟肿瘤细胞向血管或淋巴管内转移的方法，其特征在于，所述模拟肿瘤细胞向血管或淋巴管内转移的方法使用权利要求1～3任意一项所述的用于模拟细胞内渗的Transwell小室。