[发明专利]一种豨莶草高效液相特征图谱方法的构建

权利要求书

1.一种豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC的特征图谱检测方法，其特征在于：它包括以下步骤：

1）参照物溶液的制备：取对照品，溶解，即得对照品参照物溶液，取对照药材，提取，即得对照药材参照物溶液；

2）供试品溶液的制备：取豨莶草药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒，经提取，取续滤液，即得；

3）将豨莶草药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒、参照物溶液采用高效液相色谱仪分析，得到豨莶草药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒的HPLC特征图谱。

2.根据权利要求1所述的参照物溶液，其特征在于参照物溶液包括对照药材参照物溶液和咖啡酸对照品参照物溶液。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2）所述提取溶剂是指甲醇、水、甲醇-水溶液中任一一种，加入溶剂量为10-50倍。

4.根据权利要求1、3所述的检测方法，其特征在于：步骤2）所述提取方法如下：

取豨莶草药材粉末适量，研细，取约1.5g，置具塞锥形瓶中，加入水溶液25 ml，加热回流提取1 h，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得豨莶草药材供试品溶液；

取豨莶草饮片粉末适量，研细，取约1.5g，置具塞锥形瓶中，加入水溶液25 ml，加热回流提取1 h，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得豨莶草饮片供试品溶液；

取豨莶草标准汤剂冻干粉样品适量，研细，取约0.6g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25mL，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得豨莶草标准汤剂供试品溶液；

取豨莶草水溶液提取液冻干粉样品适量，研细，取约0.6 g，置具塞锥形瓶中，加入50 %甲醇25 ml，超声处理30 min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得水溶液提取液冻干粉供试品溶液；

取豨莶草配方颗粒样品适量，研细，取约0.6 g，置具塞锥形瓶中，加入50 %甲醇25 ml，超声处理30 min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得豨莶草配方颗粒供试品溶液。

5.根据权利要求1所述的豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC特征图谱的检测方法，其特征在于，所述HPLC的色谱条件为：以乙腈为流动相A，以0.05%~0.2%磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.8~1.2ml/min，柱温为25~35℃，检测波长为315~340nm，进样量为3~12μl。

6.根据权利要求1和5所述的HPLC特征图谱的检测方法，其特征在于，所述HPLC的色谱条件为：流速为1.0ml/min，柱温为30℃，检测波长为328nm。

7.根据权利要求1和5所述的豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒HPLC特征图谱的检测方法，其特征在于梯度洗脱条件为：0~40min，流动相A的体积分数变化为5%~32%，流动相B的体积分数变化为95%~68%。

8.根据权利要求1、5、6、7和8所述的检测方法，其特征在于：豨莶草药材、饮片、标准汤剂冻干粉、提取液冻干粉、配方颗粒的特征图谱的特征在于：

1）供试品色谱中应呈现10个特征峰，并应与对照药材参照物色谱中的10个特征峰保留时间相对应，其中1个峰应与咖啡酸对照品参照物峰的保留时间相对应；

2）与咖啡酸参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、2、3、5、6、7、8、9、10与S峰的相对保留时间，依次应为：0.591、0.873、0.918、1.160、1.298、1.438、1.535、1.744、2.012，且其相对保留时间应在规定值的±10%范围之内。