[发明专利]一种豨莶草高效液相特征图谱方法的构建

说明书

本申请公开了一种可适用于整体控制豨莶草药材、饮片、标准汤剂、提取液、配方颗粒及豨莶草其他制剂质量的高效液相特征图谱检测方法。本发明采用高效液相色谱建立了豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的特征图谱，并确定了10个特征峰，其中4号峰为咖啡酸峰。本发明所建立的HPLC特征图谱检测方法色谱条件梯度简单，峰形好，分离度好，专属性好，精密度高，稳定性、耐用性好，有利于评价豨莶草制剂生产全过程相关工艺的科学性、合理性，用于指导生产制备过程投料、规范生产操作，更能整体控制豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其他豨莶草制剂的内在质量，实现全过程质量控制，确保豨莶草的临床用药的安全、有效、稳定。

技术领域

本申请涉及一种豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒和其它豨莶草制剂的特征图谱的HPLC检测方法，属于中药检测、鉴别领域。

背景技术

豨莶草为菊科植物豨莶Siegesbeckia orientalis L.、腺梗豨莶Siegesbeckiapubescens Makino或毛梗豨莶Siegesbeckia glabrescens Makino的干燥地上部分。夏、秋二季花开前和花期均可釆割，除去杂质，晒干。具有祛风湿，利关节，解毒的作用。用于风湿痹痛，筋骨无力，腰膝酸软，四肢麻痹，半身不遂，风疹湿疮。

豨莶草化学成分较多且复杂，其主要成分有萜类、内酯类、苷类等。目前，《中国药典》2020年版一部项下收载了采用高效液相色谱法测定奇壬醇的含量，尚未建立特征图谱检查方法及标准。其他，有少数文献研究了豨莶草饮片（炮制前后豨莶草指标性成分及指纹图谱研究，豨莶草显微特征及指纹图谱鉴别研究，豨莶草指纹图谱研究和3种活性成分的含量测定）指纹图谱，但以上方法普遍存在以下问题：1）流动相梯度较多，条件比较复杂，必然导致条件难于转移；2）未进行中间精密度和耐用性考察，即使非常微小的条件变动也可能导致方法不耐用，仅能在论文发表单位等极少数单位使用，难以实现试验室间的顺利转移，无法用来控制豨莶草的质量。另外，该报道是单独针对豨莶草饮片建立的指纹图谱，检测波长均为215nm，所检测物质均为奇壬醇、3，7-二-O-甲基槲皮素、豨莶苷、豨莶精醇等极性偏小的化合物。未见豨莶草标准汤剂、配方颗粒指纹图谱研究的报道。豨莶草标准汤剂和配方颗粒均经水溶液提取、浓缩所得，化学成分主要是水溶性的极性化合物，其成分和豨莶草药材、饮片差别很大，因此，现有的检测方法无法用于豨莶草标准汤剂、配方颗粒的成分检测，无法有效对比和分析豨莶草药材、饮片、标准汤剂、豨莶草提取液、配方颗粒化学成分的差异与变化，难以深入认识豨莶草药效物质基础在从药材→饮片→提取液→浓缩液→喷干粉→配方颗粒成品的工艺过程的传递情况，难以整体评价和控制从豨莶草药材、饮片到配方颗粒成品的工艺过程。因此，建立统一的豨莶草药材、饮片、标准汤剂、提取液、浓缩液、喷干粉、配方颗粒特征图谱测定方法，可用于指导生产制备过程投料、规范生产操作，有利于评价豨莶草制剂生产全过程相关工艺的科学性、合理性，更能整体控制豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其他豨莶草制剂的内在质量，实现全过程质量控制，确保豨莶草的临床用药的安全、有效、稳定。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种适用于豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其他豨莶草制剂的HPLC特征图谱检测方法，该方法仅仅使用1个色谱梯度，色谱峰峰形好，分离度好，专属性好，精密度高，稳定性、耐用性好，易于实验室间转移，可用于评价豨莶草制剂生产全过程工艺的合理性，更能整体控制豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其他豨莶草制剂的内在质量，实现全过程质量控制，确保豨莶草的临床用药的安全、有效、稳定。

本发明的豨莶草制剂全过程、整体的HPLC指纹图谱的检测方法，包括如下操作步骤：

1）参照物溶液的制备：取对照品，溶解，即得对照品参照物溶液，取对照药材，提取，即得对照药材参照物溶液；

2）供试品溶液的制备：取豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒，经提取，取续滤液，即得；

3）将豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒、参照物溶液采用高效液相色谱仪分析，得到豨莶草药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC特征图谱。