[发明专利]核酸提取用乳化剂、含有该乳化剂的裂解结合液和核酸提取试剂盒及其应用有效
申请号: | 202110529427.0 | 申请日: | 2021-05-14 |
公开(公告)号: | CN113025609B | 公开(公告)日: | 2022-06-10 |
发明(设计)人: | 张良禄;郭洪;董兰兰;蔡迪;胡月;李婷婷 | 申请(专利权)人: | 武汉艾米森生命科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 深圳紫藤知识产权代理有限公司 44570 | 代理人: | 张晓薇 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 提取 乳化剂 含有 裂解 结合 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种核酸提取用裂解结合液,其特征在于,包括离液盐、第一蛋白质变性剂、螯合剂、缓冲剂、乳化剂与醇类,所述乳化剂包括吐温-20、TritonX-100与十二烷基二甲基甜菜碱;以所述裂解结合液的总体积计,吐温-20的体积百分比为5%-15%,TritonX-100的体积百分比为1%-5%,十二烷基二甲基甜菜碱的体积百分比为1%-5%;所述离液盐为碘化钠、氯化锂和高氯酸钠中的一种或多种;所述第一蛋白质变性剂为SDS、盐酸胍和异硫氰酸胍的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的核酸提取用裂解结合液,其特征在于,所述乳化剂中吐温-20、TritonX-100和十二烷基二甲基甜菜碱的体积比为(1-15):(0.2-5):1。
3.根据权利要求1所述的核酸提取用裂解结合液,其特征在于,以所述裂解结合液的总体积计,所述乳化剂的体积百分比为7%-25%。
4.根据权利要求1所述的核酸提取用裂解结合液,其特征在于,所述螯合剂为EDTA或柠檬酸钠;所述缓冲剂为Tris-HCl;所述醇类为异丙醇或无水乙醇。
5.根据权利要求1所述的核酸提取用裂解结合液,其特征在于,以所述裂解结合液的总体积计,所述离液盐的摩尔浓度为3mol/L-6mol/L;所述第一蛋白质变性剂中SDS的浓度为30-70mmol/L,盐酸胍和/或异硫氰酸胍的浓度为2mol/L-6mol/L;所述螯合剂的摩尔浓度为5-20 mmol/L;所述缓冲剂的摩尔浓度为20-100 mmol/L;所述醇类的体积分数为20%-50%。
6.一种核酸提取试剂盒,其特征在于,包括蛋白酶K、磁珠悬液、洗涤液、漂洗液、洗脱液以及权利要求1-5任一项所述的核酸提取用裂解结合液。
7.根据权利要求6所述的核酸提取试剂盒,其特征在于,所述洗涤液包括第二蛋白质变性剂和无水乙醇,所述第二蛋白质变性剂为盐酸胍和异硫氰酸胍的一种或两种,以所述洗涤液的总体积计,所述洗涤液中无水乙醇的体积分数为20%-50%,所述第二蛋白质变性剂浓度为2mol/L-6mol/L。
8.如权利要求6或7所述的核酸提取试剂盒在cfDNA提取中的应用。
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