[发明专利]一种松茸子实体蛋白源性抗氧化水解肽的制备方法

说明书

一种松茸子实体蛋白源性抗氧化水解肽的制备方法，包括松茸蛋白粉的提取和水解松茸蛋白粉，所述松茸蛋白粉的提取是将松茸子实体预处理后，溶解在pH为9.5的碱溶液中，进行超声提取，最后调节pH至8.7~9.2，在72~76℃下进行碱提取1.3~1.6h，离心取上清液进行盐析，再进行透析和冷冻干燥。本发明在pH为9.5下超声，然后进行碱提的复合提取蛋白方式提取的松茸蛋白的提取率为8.34%，松茸蛋白粉制备抗氧化水解肽的水解度达到85.8%。本发明制备的抗氧化水解肽对DPPH自由基的清除率的IC50为0.38mg/mL；对ABTS自由基的清除率的IC50为64.6μg/mL；对羟基自由基的清除率的IC50为60.4μg/mL。

技术领域

本发明涉及抗氧化肽制备技术领域，具体涉及一种松茸子实体蛋白源性抗氧化水解肽的制备方法。

背景技术

食品在贮存过程中产生的自由基主要通过氧化脂类、蛋白质类物质从而导致食品的风味、香气、质地、颜色等品质的恶化。细胞内，自由基通过氧化修饰DNA、蛋白质、脂质等分子从而引发人类的癌症、动脉硬化和衰老等相关疾病。抗氧化剂是一种化合物，可通过延缓脂质过氧化过程来延长保质期，同时可以预防自由基引起的相关疾病的发生。人造抗氧化剂，如丁基羟基茴香醚（BHA）、丁基羟基甲苯（BHT）等对几种氧化系统表现出很强的抗氧化活性，但它们会带来潜在的健康风险，因此使用受到严格管制。所以，从天然物质中寻找和开发抗氧化剂以取代食品和药材中使用的合成抗氧化剂十分必要。

松茸（Tricholoma matsutake）是一种与松科植物共生的菌根真菌，其子实体具有十分重要的商业价值，不仅因其具有独特的美味，而且还因其具有降低胆固醇、抗氧化和免疫调节活性等多种生物学活性。但是，松茸蛋白酶解肽是否具有抗氧化潜能尚未见报道。

现有技术中在蛋白提取过程中，采用了多种手段复合进行提取，比如：超声辅助酶解提取、超声辅助碱提取、酶解法与碱提法复合提取、酶解法与超声辅助碱提法复合提取等方法，但是不同原料体系中的蛋白结构、性质差异很大，其适用的提取方法也不同，且不同的提取方法，在同一体系中提取的蛋白中氨基酸组成、流变性质、热变性温度及微观结构等产生不同，导致其最终蛋白质性能、发挥的效果也不同。目前研究中存在的问题是，松茸子实体蛋白提取困难，提取过程中容易发生变性，导致蛋白提取率较低，提取的蛋白质制得的水解肽的抗氧化性能不高。

发明内容

基于目前存在的技术问题，本发明目的在于提供一种松茸子实体蛋白源性抗氧化水解肽的制备方法，显著提高蛋白提取率，提取的蛋白制备的蛋白酶水解肽具有优异的抗氧化性。

本发明目的通过如下技术方案实现：

一种松茸子实体蛋白源性抗氧化水解肽的制备方法，包括松茸蛋白粉的提取和水解松茸蛋白粉，其特征在于：所述松茸蛋白粉的提取是将松茸子实体预处理后，溶解在pH为9.5的碱溶液中，进行超声提取，最后调节pH至8.7~9.2，在72~76℃下进行碱提取1.3~1.6h，离心取上清液进行盐析，再进行透析和冷冻干燥。

本发明采用在碱性环境下进行超声处理，裂解细胞壁的同时，促进了细胞颗粒薄膜的破裂和溶解，有利于蛋白质的溶出， 同时改变了蛋白质的带电状况，从而改变了蛋白质和蛋白质之间、蛋白质和溶液之间的相互作用，之后停止超声，将pH调节至8.7~9.2，并提高温度至72~76℃，进行单一碱提，进一步破坏细胞壁结构，并促进较短时间内碱和蛋白质实现正负电荷的结合，从而提高对蛋白的溶解，该方法有效防止蛋白质在提取过程中发生变性，提高了松茸蛋白的提取率，调控了提取的蛋白质的结构、性能和稳定性，使其水解生成的水解肽具有优异的抗氧化性。

优选的，上述调节pH具体是采用氢氧化钠调节pH至9，在74℃下进行碱提1.5h。

进一步，上述超声是在功率为200~250W下进行超声处理15~20min。