[发明专利]芍药甘草汤的质量控制方法

权利要求书

1.一种芍药甘草汤的质量控制方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

供试品溶液制备步骤：取芍药甘草汤标准汤剂、芍药甘草汤对应实物或芍药甘草汤颗粒，制备芍药甘草汤供试品溶液；

对照品溶液制备步骤：取单一组分对照品，制备包含单一组分对照品的芍药甘草汤对照品溶液；

超高液相色谱检测步骤：通过超高液相色谱对所述芍药甘草汤供试品溶液和对照品溶液进行检测；其中，所述超高液相色谱检测采用二元流动相进行梯度洗脱，流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；

所述方法还包括在所述供试品溶液制备步骤之前的如下步骤：

药材基原鉴定步骤：取芍药甘草汤的原料药材，提取所述原料药材的基因组DNA，PCR扩增所述基因组DNA的ITS2片段，根据所述PCR扩增的ITS2片段鉴定药材基原。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高液相色谱检测为UHPLC-DAD检测。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述超高液相色谱的色谱条件还包括：

所述流动相A与所述流动相B的体积比为(95-5)：(5-95)；

所述二元流动相的流速为0.4mL·min^-1；

所述超高液相色谱的进样量为5μL；

所述超高液相色谱的色谱柱的柱温为30℃。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为Thermo Accucore C₁₈色谱柱，150mm×2.1mm，2.6μm。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的引物组包括：

P3，其包含如SEQ ID NO.1所示的序列的核苷酸序列，

E4，其包含如SEQ ID NO.2所示的序列的核苷酸序列。

6.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的条件为：94℃5min，35个循环，72℃7min；其中，所述循环为：94℃30s，55℃30s，72℃90s。

7.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述超高液相色谱检测步骤还包括：

测定指标成分含量的步骤：对所述芍药甘草汤供试品溶液和对照品溶液进行超高液相色谱检测，获得各自的超高液相色谱图，根据所述超高液相色谱图测定芍药甘草汤供试品中指标成分的含量；其中，所述指标成分包括芍药苷、甘草苷和甘草酸。

8.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：

芍药甘草汤的特征图谱构建步骤：对至少两个批次的芍药甘草汤供试品溶液和对照品溶液进行超高液相色谱检测，获得各自的超高液相色谱图，选择其中一个批次的芍药甘草汤供试品溶液的色谱图作为参照图谱，依据参照谱图与所述芍药甘草汤对照品溶液的色谱图确定特征峰，依据所述特征峰确定不同批次的芍药甘草汤供试品的共有峰，得到芍药甘草汤的特征图谱。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述芍药甘草汤的特征图谱包括14个特征峰。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述芍药甘草汤的特征图谱中甘草苷色谱峰为S峰，其余所述特征峰与所述S峰的相对保留时间在规定值的±5％之内。

11.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述测定指标成分含量的步骤包括：

取白芍饮片和炙甘草饮片，测定白芍饮片和/或炙甘草饮片中指标成分的含量，以所述白芍饮片和炙甘草饮片制备芍药甘草汤供试品溶液；

根据所述白芍饮片和/或炙甘草饮片中指标成分的含量，与所述芍药甘草汤供试品中指标成分的含量，获得所述芍药甘草汤供试品中指标成分的转移率。