[发明专利]一种发酵培养基及庆大霉素C1a的制备方法在审
申请号: | 202110541191.2 | 申请日: | 2021-05-18 |
公开(公告)号: | CN115369139A | 公开(公告)日: | 2022-11-22 |
发明(设计)人: | 李继安;林惠敏;张建斌;杨子艳;詹佳弘;刘垚 | 申请(专利权)人: | 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 |
主分类号: | C12P19/48 | 分类号: | C12P19/48;C12N1/20;C12R1/31 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 王卫彬;祝艳 |
地址: | 200040 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 发酵 培养基 庆大霉素 c1a 制备 方法 | ||
1.一种用于发酵绛红小单孢菌(Micromonospora purpurea)产生庆大霉素C1a的发酵培养基,其特征在于,所述的发酵培养基包括如下的组分:
玉米淀粉1-5、玉米粉1-5、冷轧黄豆粉1-5、羽毛粉0.5-3、(NH4)2SO40.05-0.2、KNO30.005-0.03、CaCO3 0.5-2、CoCl2 0.001-0.05、CaCl2 0.02-0.15、淀粉酶0.0005-0.003和消泡剂0.02-0.1,所述组分的含量单位为g/100mL;
所述发酵培养基的pH为7.5-8.5。
2.如权利要求所述的发酵培养基,其特征在于,所述发酵培养基包括如下的组分:玉米淀粉2.5、玉米粉2.0、冷轧黄豆粉2.0、羽毛粉1.0、(NH4)2SO40.08、KNO3 0.017、CaCO3 0.9、CoCl2 0.002、CaCl2 0.05、淀粉酶0.001和消泡剂0.05,所述组分的含量单位为g/100mL;
和/或,所述发酵培养基的pH为8.0。
3.一种庆大霉素C1a的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:向如权利要求1或2所述的发酵培养基中接种绛红小单孢菌(Micromonospora purpurea)CICC11015得发酵液,发酵后获得含庆大霉素C1a的溶液;
所述绛红小单孢菌与发酵培养基的体积比为(1-9):9,优选为6:9。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述发酵为在强酸性阳离子交换树脂的存在下发酵;
优选地:
所述强酸性阳离子交换树脂为上海华震科技有限公司的强酸性阳离子交换树脂001*8,和/或,所述强酸性阳离子交换树脂的树脂颗粒直径为0.4-0.6mm;
更优选地,所述强酸性阳离子交换树脂于所述发酵开始后12-36h加入所述发酵液中,例如于所述发酵开始后24h加入所述发酵液中;
进一步优选地,所述强酸性阳离子交换树脂与所述发酵液的体积比为(0.2-0.4):15,优选为0.3:15。
5.如权利要求3或4所述的制备方法,
所述发酵为在发酵罐中发酵,控制发酵时的通气量不低于1.0L·L-1min-1,罐压不低于0.03MPa,溶氧30%以上,温度为35-39℃;
和/或,所述发酵中保持搅拌,搅拌的转速为200-400r/min;所述转速的设置优选为0-2h:250r/min、2h以后:300-350r/min,更优选为0-2h:250r/min、2h以后:300r/min;
和/或,所述发酵中通过补加稀料培养基控制发酵液的总糖大于0.5g/100ml,氨基氮大于20mg/100ml,同时补水控制所述发酵液总体积保持不变;
和/或,所述发酵的时间为110-120h。
6.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述通气量为1.2-1.4L·L-1·min-1,所述罐压为0.05-0.06MPa,温度为37℃;
优选地,所述发酵进行到24h时,通过流加补料稀料培养基控制所述发酵液的总糖大于0.5g/100ml,氨基氮大于20mg/100ml,所述流加补料的流加速度为0.041L/h-0.075L/h。
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