[发明专利]一种发酵培养基及庆大霉素C1a的制备方法

说明书

本发明公开了一种发酵培养基及庆大霉素C1a的制备方法。所述制备方法包括如下步骤：向本发明所述的发酵培养基中接种绛红小单孢菌(Micromonospora purpurea)CICC11015得发酵液，发酵后获得含庆大霉素C1a的溶液；所述绛红小单孢菌与发酵培养基的体积比为(1‑9):9。本发明提供的发酵培养基具有高效价发酵庆大霉素C1a的优势。本发明的庆大霉素C1a的制备方法在使用绛红小单孢菌发酵时，提高了庆大霉素C1a的发酵效价；加入强酸性阳离子交换脂后，庆大霉素C1a的发酵效价可进一步提高。

技术领域

本发明涉及微生物工程领域，具体涉及一种发酵培养基及庆大霉素C1a的制备方法。

背景技术

《中华人民共和国药典》规定庆大霉素C组分包括C1、C1a、C2、C2a四个主要组分。其中庆大霉素C1a不仅本身抗菌活力较强，还可作为国内一类半合成新药依替米星的母核前体，故其市场需求比较迫切。目前产业化生产庆大霉素C1a的菌株多是通过诱变或基因工程菌中改造获得，针对制备方法的优化也有针对于培养基配比及补料方式的优化，但目前工业生产中发酵单位普遍偏低。

CN106801076A(程国政等)中公开了通过调整种子培养基与发酵培养基的成分及配比，同时调整补料方式及用量，综合各种参数控制，使庆大霉素C1a产量提高了43％，但其产量仅为1000ug/mL。

CN110358718A(洪文荣)中公开了通过敲除genK关键基因，阻断庆大霉素C1方向的代谢流，后又构建genL绛红色小单孢工程菌Gb1098新物种，最终效价达到1098ug/mL。

CN106498011A(杨亮等)采用化学诱变或者微波诱变的方式获得庆大霉素C1a为主要组分的新菌株，并且对种子与发酵培养基组分进行优化。但最终也并未达到很好提高庆大霉素C1a效价的效果。

由于现有技术中庆大霉素C1a的发酵效价效果不佳，故需要开发一种发酵效价更高的庆大霉素C1a发酵方法。

发明内容

针对现有技术存在庆大霉素C1发酵效价不高的技术缺陷，本发明提供一种发酵培养基及庆大霉素C1a的制备方法。其中，本发明提供的发酵培养基具有高效价发酵庆大霉素C1a的优势。本发明的庆大霉素C1a的制备方法在使用绛红小单孢菌发酵时，提高了庆大霉素C1a的发酵效价；加入强酸性阳离子交换脂后，庆大霉素C1a的发酵效价可进一步提高。

为解决上述技术问题，本发明提供过的技术方案之一为：一种用于发酵绛红小单孢菌(Micromonospora purpurea)产生庆大霉素C1a的发酵培养基，所述的发酵培养基包括如下的组分：

玉米淀粉1-5、玉米粉1-5、冷轧黄豆粉1-5、羽毛粉0.5-3、(NH₄)₂SO₄ 0.05-0.2、KNO₃ 0.005-0.03、CaCO₃ 0.5-2、CoCl₂ 0.001-0.05、CaCl₂ 0.02-0.15、淀粉酶0.0005-0.003和消泡剂0.02-0.1，所述组分的含量单位为g/100mL；

所述发酵培养基的pH为7.5-8.5。

在某一个较佳实施例中，所述发酵培养基包括如下的组分：玉米淀粉2.5、玉米粉2.0、冷轧黄豆粉2.0、羽毛粉1.0、(NH₄)₂SO₄ 0.08、KNO₃ 0.017、CaCO₃ 0.9、CoCl₂ 0.002、CaCl₂ 0.05、淀粉酶0.001和消泡剂0.05，所述组分的含量单位为g/100mL。

在某一个较佳实施例中，所述发酵培养基的pH为8.0。