[发明专利]一种松茸的真伪鉴别方法有效

专利信息
申请号: 202110542865.0 申请日: 2021-05-19
公开(公告)号: CN113151564B 公开(公告)日: 2022-05-31
发明(设计)人: 张永杰;张姝;任丽媛;孙慧慧 申请(专利权)人: 山西大学
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11
代理公司: 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 代理人: 雷立康
地址: 030006 山*** 国省代码: 山西;14
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摘要:
搜索关键词: 一种 真伪 鉴别方法
【权利要求书】:

1.一种松茸的真伪鉴别方法,其特征在于,通过PCR扩增松茸特异的DNA片段鉴别松茸的真伪,包括以下步骤:

(1)提取待测松茸样品的基因组DNA;

(2)从提取的所述基因组DNA中,获取松茸特异的DNA片段线粒体基因组序列,所述松茸特异的DNA片段为松茸线粒体DNA中的cox1P372片段,并根据线粒体基因组序列设计出进行PCR扩增的特异引物;所述cox1P372片段的PCR扩增反应的上游引物为cox1P372-F1:5′-ACATTAATACGCTAGGCTCCAAT-3′,下游引物为cox1P372-R1:5′-TCTCGTATTCTAAAGTGAGCATGA-3′;

(3)用所述特异引物进行PCR扩增;

(4)对所述PCR扩增的产物进行凝胶电泳检测;

(5)鉴别真伪松茸,将所述凝胶电泳检测的凝胶放到凝胶成像仪中进行观察,若电泳结果出现700bp或2000bp的条带,鉴别为松茸样品;若电泳结果未出现700bp或2000bp的条带,或电泳结果未出现任何条带,鉴别为混淆品;所述混淆品包括:傻松蘑、姬松茸、赤松茸。

2.一种松茸的真伪鉴别方法,其特征在于,通过PCR扩增松茸特异的DNA片段鉴别松茸的真伪,包括以下步骤:

(1)提取待测松茸样品的基因组DNA;

(2)从提取的所述基因组DNA中,获取松茸特异的DNA片段线粒体基因组序列,所述松茸特异的DNA片段为松茸线粒体DNA中的cox1P386片段,并根据线粒体基因组序列设计出进行PCR扩增的特异引物;所述cox1P386片段的PCR扩增反应的上游引物为cox1P386-F1:5′-TCAGAGACTTAACGTAGAGCATC-3′,下游引物为cox1P386-R1:5′- TCTTTCGCATTTGTTGACGTATT-3′;

(3)用所述特异引物进行PCR扩增;

(4)对所述PCR扩增的产物进行凝胶电泳检测;

(5)鉴别真伪松茸,将所述凝胶电泳检测的凝胶放到凝胶成像仪中进行观察,若电泳结果出现900bp的条带,鉴别为松茸样品;若电泳结果未出现900bp的条带,或电泳结果未出现任何条带,鉴别为混淆品;所述混淆品包括:傻松蘑、姬松茸、赤松茸。

3.一种松茸的真伪鉴别方法,其特征在于,通过PCR扩增松茸特异的DNA片段鉴别松茸的真伪,包括以下步骤:

(1)提取待测松茸样品的基因组DNA;

(2)从提取的所述基因组DNA中,获取松茸特异的DNA片段线粒体基因组序列,所述松茸特异的DNA片段为松茸线粒体DNA中的nad5P417片段,并根据线粒体基因组序列设计出进行PCR扩增的特异引物;所述nad5P417片段的PCR扩增反应的上游引物为nad5P417-F1:5′-TCCCGGCCTAAGTGTAATGT-3′,下游引物为nad5P417-R1:5′- ACAACTATTCCTCCATCATCCTT-3′;

(3)用所述特异引物进行PCR扩增;

(4)对所述PCR扩增的产物进行凝胶电泳检测;

(5)鉴别真伪松茸,将所述凝胶电泳检测的凝胶放到凝胶成像仪中进行观察,若电泳结果出现750bp的条带,鉴别为松茸样品;若电泳结果未出现750bp的条带,或电泳结果未出现任何条带,鉴别为混淆品;所述混淆品包括:傻松蘑、姬松茸、赤松茸。

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