[发明专利]CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法有效
| 申请号： | 202110554047.2 | 申请日： | 2021-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN113281289B | 公开（公告）日： | 2022-09-20 |
| 发明（设计）人： | 盖盼盼;李峰;宋盼盼;蒲黎 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | G01N21/33 | 分类号： | G01N21/33 |
| 代理公司： | 青岛晸投知识产权代理事务所(普通合伙) 37353 | 代理人： | 李常芳 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | ceo2 有机磷 水解 氧化物 活性 比率 传感 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.基于CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法，其特征在于，比率传感检测方法的构建，具体构建方法为：
步骤一：不同浓度对氧磷标准样品与二氧化铈纳米酶孵育，离心取出上清液测紫外可见吸收得到对硝基苯酚信号A400；
步骤二：步骤一离心后得到的沉淀，用醋酸缓冲溶液溶解，然后取上述溶液与配置好的TMB反应测紫外可见吸收，得到氧化态TMB的吸收峰A653；最后通过对硝基苯酚的信号与氧化态TMB的信号作比值；
所述二氧化铈纳米酶的制备方法为：将氯化铈溶解于75mL超纯水中，之后加入氨水和过氧化氢，100℃加热1h并不断搅拌，得到淡黄色沉淀，将黄色沉淀离心，用超纯水洗涤至pH为中性，最后得到的沉淀置于烘箱中干燥备用；
基于CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法，所述比率传感检测方法的构建，具体构建方法为：不同浓度对氧磷标准样品与浓度为1-10mg/mL二氧化铈纳米酶，36-90℃反应0.5-1h，离心取出上清液测紫外可见吸收得到对硝基苯酚信号A400；上述步骤得到的沉淀，用pH＝4醋酸缓冲溶液溶解至1-5mg/mL，然后取上述溶液与配置好的TMB反应测紫外可见吸收，得到氧化态TMB的吸收峰A653，最后通过对硝基苯酚的信号与氧化态TMB的信号作比值。
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