[发明专利]CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法

说明书

本发明基于CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法，其特征在于，比率传感检测方法的构建，具体构建方法为：步骤一：不同浓度对氧磷标准样品与二氧化铈纳米酶孵育，离心取出上清液测紫外可见吸收得到对硝基苯酚信号A400；步骤二：步骤一离心后得到的沉淀，用醋酸缓冲溶液溶解，然后取上述溶液与配置好的TMB反应测紫外可见吸收，得到氧化态TMB的吸收峰A653。最后通过对硝基苯酚的信号与氧化态TMB的信号作比值。本发明该传感方法检测过程中实验成本低、准确性好、选择性高、检测速度快，因此，本发明设计的基于CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法，可快速灵敏的检测对氧磷。

技术领域

本发明涉及农化学技术领域，具体涉及CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法。

背景技术

农药残留超标会对食用者身体健康造成危害，长期食用农药残留超标的蔬菜或其他农产品，会使人免疫力降低，甚至中毒死亡。有机磷类农药是一种神经毒物，会引起神经功能紊乱。目前实验室常用的分析方法存在样品预处理复杂、成本高、依赖训练有素的工作人员、非常耗时等问题，限制了其实际应用。生物传感方法具有简单快速、准确性高、便携性好、成本效益低和易于现场检测等优点，减少了样品制备、信号输出所需的时间和成本，操作简便，灵敏度高。

模拟酶是用人工方法合成的具有酶性质的催化剂，结构更简单，化学性质更稳定，具有酶的性质，还具有高效、高选择性和价廉易得等优点。二氧化铈是铈的氧化物，其中铈离子有两种价态，铈离子价态之间可通过氧化或者还原相互转变。因此，二氧化铈具有光学、磁学、电化学、仿氧化物酶活性及仿磷酸酶活性等多种性质。

本发明针对这一问题，基于此，提出一种基于CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

基于CeO2仿有机磷水解酶和仿氧化物酶活性的比率传感检测方法，比率传感检测方法的构建，具体构建方法为：

步骤一：不同浓度对氧磷标准样品与二氧化铈纳米酶孵育，离心取出上清液测紫外可见吸收得到对硝基苯酚信号A400；

步骤二：步骤一离心后得到的沉淀，用醋酸缓冲溶液溶解，然后取上述溶液与配置好的TMB反应测紫外可见吸收，得到氧化态TMB的吸收峰A653。最后通过对硝基苯酚的信号与氧化态TMB的信号作比值。

优选地，所述二氧化铈纳米酶的制备方法为：将氯化铈溶解于75mL超纯水中，之后加入氨水和过氧化氢，100℃加热1h并不断搅拌，得到淡黄色沉淀，将黄色沉淀离心，用超纯水洗涤至pH为中性，最后得到的沉淀置于烘箱中干燥备用。

优选地，所述比率传感检测方法的构建，具体构建方法为：不同浓度对氧磷标准样品与浓度为1-10mg/mL二氧化铈纳米酶，36-90℃反应0.5-1h，离心取出上清液测紫外可见吸收得到对硝基苯酚信号A400；上述步骤得到的沉淀，用pH＝4醋酸缓冲溶液溶解至1-5mg/mL，然后取上述溶液与配置好的TMB反应测紫外可见吸收，得到氧化态TMB的吸收峰A653，最后通过对硝基苯酚的信号与氧化态TMB的信号作比值。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：