[发明专利]一种巨大血小板综合征的斑马鱼模型

说明书

本发明公开了一种巨大血小板综合征的斑马鱼模型。该斑马鱼模型为gp9^SMU15突变体斑马鱼。本发明中首次发现了斑马鱼上gp9突变与血小板的增殖有关，该斑马鱼gp9^SMU15突变体具有与人类似的巨大血小板综合征的症状，并证明该gp9^SMU15突变体斑马鱼凝血功能障碍。另外，本发明根据该斑马鱼模型首次建立了血小板减少，凝血功能障碍的Bernard‑Soulier Syndrome疾病模型，该斑马鱼模型可成为研究Bernard‑Soulier Syndrome疾病及药物筛选的新载体。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及研究血小板发育研究领域，具体涉及一种巨大血小板综合征的斑马鱼模型。

背景技术

血小板是血液系统中主要的组成部分。当血管破损时，血小板起到了止血和凝血的作用。当血小板数目减少或者功能减退，会导致机体止血功能障碍和血栓形成不良，并且引发相关的血小板疾病。巨大血小板综合征,又称Bernard-Soulier Syndrome,一种罕见的遗传性出血性疾病，其发病率不足1/100万，主要是由于血小板膜上的糖蛋白复合体GPIb-IX-V的合成和表达缺陷或者其中任一亚基GPIb，GPIX和GPV的基因缺陷所导致。GPIb-IX-V的缺陷导致血小板不能正常粘附到血管内皮上而导致皮肤，黏膜出血或者内脏出血，出血轻重不一。病人的外周血中会出现巨大的血小板且轻度或中度的血小板数目的减少。(AnnaSavoia,Annalisa Pastore,Daniela De Rocco,et al.(2011).Clinical and geneticaspects of Bernard-Soulier syndrome:searching for genotype/phenotypecorrelations.Haematologica 96(3):417-423).在老鼠的模型中，外周血中血小板的形态也出现了异常，能形成伪足样的血小板(偏成熟的血小板)数目减少，说明GPIb-IX-V对血小板的形态的维持和成熟发挥了重要的作用。(C.Strassel,C.Nonne,A.Eckly,T.David,C.Leon,et al.(2007).Decreased Thrombotic Tendency in Mouse Models of theBernard-Soulier Syndrome.ArteriosclerThrombVasc Biol.27:241-247).在13例Bernard-Soulier病例报导中，发现有7例GPIX这一基因的错义突变的病人。

为了更好地研究GPIX在血小板中的作用以及Bernard-Soulier Syndrome巨大血小板的发病机制，需要观察胚胎的发育和大规模的药物筛选。因此，需要建立一种相关的动物模型。

发明内容

为了克服现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种巨大血小板综合征的斑马鱼模型。本发明提供的巨大血小板综合征的斑马鱼模型是一种GPIX基因突变致血小板减少的斑马鱼模型。

本发明为了更好地研究gp9在早期发育血小板中的作用以及相关的调控机制，构了建斑马鱼突变体gp9并应用于制备相应的疾病模型(巨大血小板综合征的斑马鱼模型)。由于斑马鱼产卵高，体外受精，早期胚胎发育透明的特性，有利于观察血小板的行为变化。同时，也有利于一些治疗巨大血小板综合征的大规模药物筛选。

本发明的目的在于提供一种巨大血小板综合征的斑马鱼模型。本发明提供的GPIX基因突变致血小板减少斑马鱼模型可以应用于Bernard-Soulier巨大血小板综合征发病机制的研究。

本发明的目的至少通过如下技术方案之一实现。

本发明提供的巨大血小板综合征的斑马鱼模型，该斑马鱼模型为gp9^SMU15突变体斑马鱼。

进一步地，gp9^SMU15突变体斑马鱼的表型是由GP9基因异常表达引起，即由gp9^SMU15突变引起。