[发明专利]含有外泌体和胶原蛋白的治疗皮肤损伤的药物组合物

说明书

本发明涉及含有外泌体和胶原蛋白的治疗皮肤损伤的药物组合物。本发明通过多肽处理干细胞制备并获得了外泌体，同时通过优化的酶处理获得了胶原蛋白肽，将外泌体与胶原蛋白肽和罗哌卡因一起制备成为药物后，可以有效的促进免疫低下小鼠的皮肤损伤的愈合，具有较好的治疗效果。

技术领域

本发明涉及药物领域，更具体的涉及含有外泌体和胶原蛋白在制备药物中的应用。

背景技术

外泌体是一种可由各类细胞分泌的纳米级囊泡。其表面和内部有多种蛋白、mRNA、miRNA以及长链非编码RNA(LncRNA)等活性物质。外泌体具有高度稳定性，甚至可耐受低浓度Triton-100的处理，可广泛存在于人体体液中，包括唾液、血液、尿液及脑脊液等。现已证实外泌体不仅是细胞的代谢产物，而且具有在细胞间传递信息的生物学功能，研究证明外泌体在皮肤损伤修复以及美白和抗衰老中具有重要作用。

外泌体促进伤口愈合的研究已经存在。事实上，已有大量报道证实间充质干细胞分泌的外泌体(MSC-Exo)具有再生功能。2010年Lai等在研究MSC来源的上清液(CM)对心脏的保护作用时，发现是CM中大于1000ku的组分介导了主要的保护作用，进而分离出一种称为外泌体的微小囊泡。Shabbir等发现MSC-Exo可以激活蛋白激酶B(Akt)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)等信号级联通路，提高肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子(IGF)-1及神经生长因子(NGF)等因子的表达量，来促进伤口愈合。2015年，Zhang等发现MSC-Exo通过激活Wnt4/β-Catenin通路加快血管新生，紧接着该课题组进一步通过皮下注射MSC-Exo，显著促进烫伤后皮肤的恢复及再生。

胶原蛋白含量减少被认为是皮肤衰老的重要指标之一。胶原蛋白广泛分布于动物的骨骼、皮肤、血管、韧带、软骨等组织器官中，是结缔组织重要的结构蛋白，也是动物蛋白中含量最丰富的蛋白质，占总蛋白的25％-30％，起到了支持器官保护机体的功能。迄今为止，共发现了29种胶原蛋白，其中Ⅰ型胶原蛋白含量最高，约为90％。胶原蛋白是由3条α多肽链构成的三股螺旋结构，其分子结构十分稳定，相对分子量在30KDa以上，不利于人体直接吸收。水解胶原蛋白是胶原蛋白经酶解后生成的产物，具有抗衰老、促进皮肤胶原代谢、促进骨骼关节健康、抑制血压上升、保护胃粘膜、抗溃疡等营养及生理功能，在食品、化妆品及医药等领域具有巨大的应用前景。1999年丹麦学者Kieffer等人研究了口服水解鱼胶原蛋白对光损伤皮肤的修复作用。共有144名皮肤光损伤的志愿者参加了此次实验，实验12个月后，发现乳头真皮和网状真皮的回声和密度逐渐提高，说明真皮层厚度增加。同时采用VAS临床分级的方法进行评价，发现口服鱼水解胶原蛋白能够改善皮肤状况，减少眼部皱纹，提高光损伤人群皮肤的屏蔽能力。中国学者Zhuang等人研究了日本刺参水解胶原蛋白对紫外线诱导的光老化模型小鼠皮肤的保护试验，发现水解胶原蛋白能够显著改善小鼠皮肤胶原纤维的受损程度，显著提高机体的抗氧化能力，提高了皮肤组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH－Px)、过氧化氢酶(CAT)活性，降低了丙二醛(MDA)含量，对紫外线诱导的光老化模型小鼠皮肤具有保护作用。同时水解胶原蛋白还能够显著提高皮肤中神经酰胺和羟脯氨酸的含量，此外研究还发现，分子量越低，对光损伤皮肤修复的效果越好。日本学者Tanaka等人研究发现，口服水解胶原蛋白能够抑制UV－B导致的皮肤中水分含量、表皮细胞增生的下降，减少可溶性胶原蛋白。结果显示水解胶原蛋白可以作为膳食补充剂，改善由UV－B导致的受损皮肤和光老化皮肤。

虽然目前采用外泌体和胶原蛋白用于皮肤中的研究已经存在，但是将二者进行组合使用的研究还比较少，特别是将外泌体和胶原蛋白肽组合的研究也不多。

发明内容

本发明克服了现有技术的缺陷，提供了一种采用外泌体与胶原蛋白肽和罗哌卡因一起用于制备免疫低下型皮肤损伤的治疗药物。

本发明通过研究发现，活性肽能够显著的促进干细胞的活性，能够促进干细胞外泌体的产量以及相应的外泌体中细胞因子的含量，进而提高外泌体的活性。