[发明专利]格氏嗜盐碱杆菌Argonaute融合蛋白及其在标记DNA与RNA中的应用在审

专利信息
申请号: 202110558514.9 申请日: 2021-05-21
公开(公告)号: CN113416261A 公开(公告)日: 2021-09-21
发明(设计)人: 董张及;刘梅;刘炎 申请(专利权)人: 南通大学
主分类号: C07K19/00 分类号: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10;G01N21/64
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 黄欣
地址: 226019 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 格氏嗜 盐碱 杆菌 argonaute 融合 蛋白 及其 标记 dna rna 中的 应用
【权利要求书】:

1.NgAgo-EGFP融合蛋白,由NgAgo与EGFP融合得到,所述NgAgo的序列如SEQ ID NO.3所示,EGFP的序列如SEQ ID NO.4所示。

2.根据权利要求1所述的NgAgo-EGFP融合蛋白,其特征在于:所述NgAgo-EGFP融合蛋白还包括N-端核定位信号、C-端核定位信号和弹性蛋白多肽。

3.根据权利要求1所述的NgAgo-EGFP融合蛋白,其特征在于:所述NgAgo-EGFP融合蛋白的序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。

4.一种表达权利要求1所述NgAgo-EGFP融合蛋白的基因,其特征在于:将权利要求1所述NgAgo-EGFP融合蛋白按密码子表对应关系转换为cDNA序列,并针对应用对象所述物种进行密码子优化获得的基因。

5.一种表达利要求1所述NgAgo-EGFP融合蛋白的质粒,其特征在于:将权利要求1所述NgAgo-EGFP融合蛋白的基因克隆到表达载体后获得。

6.一种RNA标记工具,其特征在于:包括权利要求1所述融合蛋白、权利要求4所述基因或权利要求5所述质粒,以及向导DNA。

7.根据权利要求6所述的RNA标记工具,其特征在于:所述向导DNA为与目的RNA序列反向互补,5’端或3’端修饰有Cy3荧光基团标记,长度为10bp至50bp的序列片段。

8.权利要求6所述的RNA标记工具在标记真核细胞DNA与RNA中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:采用权利要求6所述NgAgo RNA标记工具与转染试剂共转染细胞,然后进行显微成像。

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