[发明专利]文昌鱼C型凝集素BjCTL4基因及其应用有效
| 申请号： | 202110559923.0 | 申请日： | 2021-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN113372428B | 公开（公告）日： | 2022-07-08 |
| 发明（设计）人： | 黄慧清;黄盛丰;徐安龙;严信宇;李军;徐立群;杨满意;徐单单;陈素红;王霞 | 申请（专利权）人： | 广东食品药品职业学院 |
| 主分类号： | C07K14/46 | 分类号： | C07K14/46;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/17;A61K48/00;A61P31/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京市万慧达律师事务所 11111 | 代理人： | 谢敏楠 |
| 地址： | 510000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 文昌鱼 凝集素 bjctl4 基因 及其 应用 | ||
1.一种多肽，其特征在于，所述多肽的序列如SEQ ID NO：4所示。
2.一种多肽，其特征在于，所述多肽的序列如SEQ ID NO.：3所示。
3.一种核酸，其编码如权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述核酸分子的序列如SEQID NO：2所示。
4.一种核酸，其编码如权利要求2所述的多肽，其特征在于，所述核酸分子的序列如SEQID NO：1所示。
5.权利要求1所述的多肽的表达方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.构建载有如权利要求3所述的核酸的重组表达载体；
S2.将步骤S1制备的重组表达载体转化宿主细胞；
S3.对步骤S2制备的转化后的宿主细胞进行培养；
S4.对步骤S3培养后的宿主细胞进行多肽的提取和纯化。
6.如权利要求5所述的表达方法，其特征在于，所述步骤S1包括以下步骤：
S1.1根据如权利要求3所述的核酸的序列设计引物；
S1.2以含有如权利要求3所述的核酸序列的pGEX-T easy vector质粒为模板，以S1.1的引物进行PCR扩增；
S1.3将步骤S1.2的PCR扩增产物克隆到表达载体上，得到重组表达载体。
7.如权利要求6所述的表达方法，其特征在于，所述引物的选自SEQ ID NO.：5和SEQ IDNO.：6所示的引物。
8.如权利要求2所述的表达方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.构建载有如权利要求4所述的核酸的重组表达载体；
S2.将步骤S1制备的重组表达载体转化宿主细胞；
S3.对步骤S2制备的转化后的宿主细胞进行培养；
S4.对步骤S3培养后的宿主细胞进行多肽的提取和纯化。
9.如权利要求8所述的表达方法，其特征在于，所述步骤S1包括以下步骤：
S1.1根据如权利要求4所述的核酸的序列设计引物；
S1.2以含有如权利要求4所述的核酸序列的pGEX-T easy vector质粒为模板，以S1.1的引物进行PCR扩增；
S1.3将步骤S1.2的PCR扩增产物克隆到表达载体上，得到重组表达载体。
10.如权利要求9所述的表达方法，其特征在于，所述引物的选自SEQ ID NO.：7和SEQID NO.：8所示的引物。
11.如权利要求6或9所述的表达方法，其特征在于，所述引物含有Kpn I和/或Xho I切割位点。
12.如权利要求5或8所述的表达方法，其特征在于，所述步骤S4中蛋白的纯化选自亲和层析法。
13.如权利要求12所述的表达方法，其特征在于，所述亲和层析法选自Ni2+-ChelatingSepharose Fast Flow。
14.一种载体，其包含如权利要求3所述的核酸分子。
15.一种载体，其包含如权利要求4所述的核酸分子。
16.如权利要求14或15所述的载体，其特征在于，所述载体选自质粒、噬菌体、人工染色体、病毒中的至少一种。
17.如权利要求14或15所述的载体，其特征在于，所述载体选自质粒。
18.如权利要求14或15所述的载体，其特征在于，所述载体选自pET23a-ELP-GFP或pET-SUMO。
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