[发明专利]文昌鱼C型凝集素BjCTL4基因及其应用

说明书

本申请属于生物领域，提供了文昌鱼C型凝集素BjCTL4基因及其应用。本申请首次发现的C型凝集素BjCTL4基因编码的蛋白，其CTL样结构域具有传统CTL的基本特征，包括两对或者三对保守的二硫键，特征性基序WIGL的类似基序，以及与Ca²⁺相关的糖结合基序QPD/EPN和WND的类似基序，经过初步验证能较为广泛结合细菌表面的多糖，并且有明显的细菌结合、细菌凝集作用，可发展为天然的抑菌活性物质以及制备治疗感染性疾病的药物。

技术领域

本申请属于生物领域，具体涉及文昌鱼C型凝集素BjCTL4基因及其应用。

背景技术

文昌鱼(代表性的例子如：青岛文昌鱼(Branchiostoma japonicum))，属于脊索动物门(Chordate)，头索动物亚门(cephalochordate)，是现存和脊椎动物亲缘关系最近的无脊椎动物。文昌鱼缺乏类似脊椎动物的适应性免疫系统，但仍然能在充满病原微生物的海洋环境中健康生存，主要依赖于其有效而特异的免疫系统。先天免疫系统的诱导性防御机制是由一系列的模式识别分子(PRR)识别病原相关分子模式(PAMP)，并起始各种信号途径控制一系列免疫相关基因的表达从而达到清除病原体的效果。

C型凝集素(C type lectin,CTL)超家族是一类包含C-type lectin likedomains(CTLDs)且功能广泛的蛋白。利用凝集素分子通过模式识别效应来区分“自己”和“非己”也已经成为无脊椎动物和脊椎动物参与先天免疫的重要手段。

关于人类和其它哺乳动物CTL家族的免疫功能研究已经积累了大量资料，并且随着对高等动物CTL家族在天然免疫中重要性的认识，人们意识到低等动物，如鱼类、昆虫、甲壳动物、软体动物和线虫等，其CTL分子在先天免疫中也是占据非常重要的地位。

文昌鱼和脊椎动物CTL分子的同源性相差较大，但令人惊讶的是脊椎动物几类CTL蛋白都能在文昌鱼中找到同源物，如SEEC、DGCR2、polycystin和collectin等，并且dualCTLD类CTL蛋白也存在于文昌鱼中。对文昌鱼CTL家族的初步功能分析显示，它们功能广泛，但多数是作为一种急性免疫反应蛋白参与对机体的防御。其中由N端信号肽和单个CTLD组成的CTL分子AmphiCTL1具有细菌识别和凝集的活性，可以作为PRR参与文昌鱼先天免疫反应，并且与其它CTL分子功能不同的是，它还具有直接杀伤特异微生物的活性，其活性的发挥主要通过结合微生物细胞壁上的肽聚糖和葡聚糖完成的(Yu et al.,2007)。

文昌鱼是现存的最原始的脊索动物代表，其基因组水平、形体结构和免疫机制都代表了最简单的脊椎动物模式，是研究脊椎动物免疫系统的起源和进化的理想实验动物模型。结合低等动物CTL家族的多样性和复杂性，对文昌鱼的CTL进行深入的研究，从而研究文昌鱼的免疫防御机制和对病原感染应答的规律，能够为阐明海水养殖动物免疫防御机制提供资料，为开发海水养殖控制病害提供新方法、新思路，也为养殖水产动物病害的免疫防治技术提供理论依据。

发明内容

一方面，本申请提供了一种多肽，所述多肽的序列如SEQ ID NO：4所示。

一方面，本申请提供了一种包含SEQ ID NO：4所述序列的多肽；在一些实施方案中，所述多肽的序列如SEQ ID NO.：3所示。

一方面，本申请提供了一种核酸，其编码所述的多肽；在一些实施方案中，所述核酸分子的序列如SEQ ID NO：2所示；在一些实施方案中，所述核酸分子的序列如SEQ ID NO：1所示。

一方面，本申请提供了所述多肽的表达方法，包括以下步骤：

S1.构建载有所述的核酸的重组表达载体；

S2.将步骤S1制备的重组表达载体转化宿主细胞；

S3.对步骤S2制备的转化后的宿主细胞进行培养；