[发明专利]多重RT-PCR同时检测菊花中3种病毒和2种类病毒的方法在审
| 申请号： | 202110561124.7 | 申请日： | 2021-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN113278734A | 公开（公告）日： | 2021-08-20 |
| 发明（设计）人： | 陈东亮;王森;黄丛林;罗昌;刘华;程曦 | 申请（专利权）人： | 北京农业生物技术研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/94 |
| 代理公司： | 北京律恒立业知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11416 | 代理人： | 庞立岩 |
| 地址： | 100097 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多重 rt pcr 同时 检测 菊花 病毒 种类 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种多重RT-PCR同时检测菊花中3种病毒和2种类病毒的方法，其特征在于：采用如下引物对组合：
CSVd-F和CSVd-R，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；
CChMVd-F和CChMVd-R，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示；
CVB-F和CVB-R，其核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示；
TAV-F和TAV-R，其核苷酸序列如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示；
TSWV-F和TSWV-R，其核苷酸序列如SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示。
2.根据权利要求1所述的多重RT-PCR同时检测菊花中3种病毒和2种类病毒的方法，其特征在于：多重PCR反应体系如下：
反应程序：94℃预变性4min；94℃变性30s，55.3℃退火30s，72℃30s，循环35；72℃再延伸10min；4℃保存。
3.根据权利要求2所述的多重RT-PCR同时检测菊花中3种病毒和2种类病毒的方法，其特征在于：所述3种病毒为菊花B病毒、番茄不孕病毒和番茄斑萎病毒，2种类病毒为菊花矮化类病毒和菊花褪绿斑驳类病毒。
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