[发明专利]一种沙棘蛋白多肽的制备方法

权利要求书

1.一种沙棘蛋白多肽的制备方法，其特征在于，具体步骤包括如下：

步骤1，酶解：称取沙棘蛋白，用纯水混合按照一定料液比与沙棘蛋白溶液，加入蛋白酶，进行酶解；

步骤2，灭酶：酶解至预定时间后，调节pH至沙棘籽蛋白的等电点，而后将酶解体系移至预先升温至90℃的恒温震荡水浴锅内，保持15min使酶的活性丧失；

步骤3，离心：将灭酶后的沙棘蛋白酶解体系冷却，离心取上清液，即为沙棘多肽提取物；

步骤4，浓缩：用旋转蒸发器浓缩离心后的沙棘多肽提取物，浓缩溶液至浓度为45～50％；

步骤5，真空冷冻干燥：将浓缩后的沙棘多肽提取物在5℃条件下预冷，然后将其在-80℃下冷冻，用真空冷冻干燥机在-90℃下真空冷冻干燥36h，即得到沙棘蛋白肽粉末。

2.根据权利要求1所述的一种沙棘蛋白多肽的制备方法，其特征在于，所述的蛋白酶为酸性蛋白酶，酶解条件为温度为40～50℃、pH值为2～3、加酶量3000～5000u/g、料液比1:15～25。

3.根据权利要求2所述的一种沙棘蛋白多肽的制备方法，其特征在于，所述的蛋白酶为酸性蛋白酶，酶解条件为温度为50℃、pH值为3、加酶量4000u/g、料液比1:20。

4.根据权利要求1所述的一种沙棘蛋白多肽的制备方法，其特征在于，所述的沙棘蛋白为以沙棘籽粕为原料，利用醇提+碱提酸沉+酶解的提取方法制备，具体步骤为：

步骤1，原料预处理：将沙棘籽粕烘干粉碎后，过40～120目筛，优化的80目，备用；

步骤2，酶解：在步骤1得到的沙棘籽粕中，加120～360u/g纤维素酶去纤维素，优化为加240u/g纤维素酶去纤维素，使与纤维素结合的蛋白分离出来；

步骤3，醇提：将75％乙醇加入提取罐内，开启搅拌，缓慢加入沙棘籽粕粉，严禁把沙棘籽粕一并倒入提取罐，开启蒸汽加热，加热到45℃搅拌90min后离心，留沙棘籽粕沉淀；其中，所加沙棘籽粕与乙醇的料液比为1:6～14，优化为沙棘籽粕与乙醇的料液比为1:12；

步骤4，减解：

S1，第一次减提：将步骤1预处理过的沙棘籽粕与水按1：8～16的料液比加入另一提取罐内，开启搅拌，缓慢加入醇提离心后的沙棘籽粕沉淀，搅拌均匀；开启蒸汽加热，加热到30～70℃时缓慢加入20％NaOH水溶液，调pH至8～12搅拌，在反应过程中，及时监控pH的变化情况，及时加碱调pH至8～12，离心留上清液，沙棘籽粕沉淀用于第二次碱提，其中减提时间为20～60min；

S2，第二次减提：依照步骤S1的方法对沙棘籽粕沉淀进行第二次碱提，离心后将两次上清液混合在一起；

其中，上述减提步骤中，沙棘籽粕原料与水的料液比为1:10～14；蒸汽加热的加热温度为40～50℃；pH为10～11；减解时间为40～50min；

步骤5，酸沉：将步骤4碱提离心后的上清液加入新的提取罐中，在搅拌条件下缓慢加入乳酸，调pH至4.5；pH稳定后停止搅拌，静置6～8h，备用；

步骤6，离心：将酸沉静置后的溶液离心，取出离心后的沉淀；

步骤7，干燥、粉碎：温度在45℃以下将沙棘籽蛋白提取物烘干，粉碎烘干后的蛋白粉并且过80目筛网。