[发明专利]一种沙棘蛋白多肽的制备方法

说明书

本发明涉及沙棘蛋白多肽的提取技术领域，具体涉及一种沙棘蛋白多肽的制备方法。主要以沙棘蛋白为原料通过蛋白酶酶解后，然后离心、浓缩及干燥后制备成具有多种生物活性的沙棘多肽产品。本发明方法值得的沙棘多肽得率的最高达到65.09％。其中，沙棘蛋白利用醇提+碱提酸沉+酶解的高效提取方法，产品纯度明显提高，碱酶两步法提取沙棘蛋白是在碱提酸沉法的基础上增加了酶解步骤，将提取蛋白后分离的残渣中的蛋白进一步提取，达到综合利用的目的，且可提高沙棘籽粕蛋白的提取率，沙棘籽蛋白的提取率为78.45％，蛋白含量为82.04％。

技术领域

本发明涉及沙棘蛋白多肽的提取技术领域，具体涉及一种沙棘蛋白多肽的制备方法。

背景技术

沙棘籽粕是沙棘籽经过初级利用(提油或不饱和脂肪酸)以后的工业副产物，目前沙棘籽中共鉴定出了61种化合物，其中酯类化合物24种、脂肪酸12种(8种饱和脂肪酸和4种不饱和脂肪酸)、烷烃类和烯烃类物质22种、氯代烃类物质3种。沙棘籽粕分离出的蛋白几近完全蛋白质，且含量≥20％，现已分鉴定出18种氨基酸，其中包括人体所需的全部必须氨基酸和2种半必须氨基酸。沙棘籽粕所含化合物的种类、含量因其种属、生长环境、产地、采收期等因素的影响会有所不同。沙棘籽粕是一种良好的植物蛋白资源，但通常作为动物饲料使用或被当作废渣丢弃，没有发挥其完全的利用潜质。

生物活性肽是指由10～100个氨基酸分子脱水缩合而成的，对调节生物机体的生命活动有显著作用或具有特殊生理功能的肽类化合物，又称功能肽。沙棘蛋白通过蛋白酶酶解可制备成具有多种生物活性的沙棘多肽产品。将沙棘巧蛋白加工成具有生理活性的多肽，能够开发出多种食品添加剂级及饲料添加剂级的活性肽成分来。不但可以丰富食品添加剂和饲料添加剂市场，填补沙棘多肽产品市场空白，而且可以大大的提高沙棘的综合利用，从而产生良好的经济与社会效益。

发明内容

基于上述技术问题，本发明主要针对从沙棘籽粕中提取的沙棘籽蛋白为原料，通过蛋白酶酶解参数优化制备具有多种生物活性的沙棘多肽产品。目的是提供一种沙棘蛋白多肽的制备方法。

本发明保护一种沙棘蛋白多肽的制备方法，具体步骤包括如下：

步骤1，酶解：称取沙棘蛋白，用纯水混合按照一定料液比与沙棘蛋白溶液，加入蛋白酶，进行酶解；

步骤2，灭酶：酶解至预定时间后，调节pH至沙棘籽蛋白的等电点，而后将酶解体系移至预先升温至90℃的恒温震荡水浴锅内，保持15min使酶的活性丧失；

步骤3，离心：将灭酶后的沙棘蛋白酶解体系冷却，离心取上清液，即为沙棘多肽提取物；

步骤4，浓缩：用旋转蒸发器浓缩离心后的沙棘多肽提取物，浓缩溶液至浓度为45～50％；

步骤5，真空冷冻干燥：将浓缩后的沙棘多肽提取物在5℃条件下预冷，然后将其在-80℃下冷冻，用真空冷冻干燥机在-90℃下真空冷冻干燥36h，即得到沙棘蛋白肽粉末。

进一步的，所述的蛋白酶为酸性蛋白酶，酶解条件为温度为40～50℃、pH值为2～3、加酶量3000～5000u/g、料液比1:15～25。

优化的，所述的蛋白酶为酸性蛋白酶，酶解条件为温度为50℃、pH值为3、加酶量4000u/g、料液比1:20。

进一步的，所述的沙棘蛋白为以沙棘籽粕为原料，利用醇提+碱提酸沉+酶解的提取方法制备，具体步骤为：

步骤1，原料预处理：将沙棘籽粕烘干粉碎后，过40～120目筛，优化的80目，备用；

步骤2，酶解：在步骤1得到的沙棘籽粕中，加120～360u/g纤维素酶去纤维素，优化为加240u/g纤维素酶去纤维素，使与纤维素结合的蛋白分离出来；