[发明专利]一种用于三种分子间结合作用解析的荧光三元相关光谱系统有效
申请号: | 202110563055.3 | 申请日: | 2021-05-21 |
公开(公告)号: | CN113295662B | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 董朝青;任吉存 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 河南大象律师事务所 41129 | 代理人: | 王映朴 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 分子 结合 作用 解析 荧光 三元 相关 光谱 系统 | ||
1.一种用于三种分子间结合作用解析的荧光三元相关光谱系统,其特征在于:
所述荧光三元相关光谱系统包括至少三个输出不同波长的激发光源,激发光源同轴发射的激光束照明样品激发产生的荧光信号,荧光信号由多组二色镜根据荧光波长分成多路信号,分别传导至对应的单光子探测器进行信号探测,信号传输至与对应单光子探测器相连的信号采集卡和运算卡,并进行三元相关函数实时运算,获得荧光三元相关光谱曲线;
所述激发光源至少包括三个输出波长分别为488nm、561nm和640nm激光束的激光器;
三个激光束产生的荧光强度波动信号(I2(t),I3(t)和I4(t))使用下面三元相关函数进行实时运算,获得三元相关光谱曲线,
对获得的三元相关光谱曲线采用以下模型获得G(0,0)和τD参数,
其中,τ1和τ2为561nm和640nm检测通道与488nm检测通道相关时的延迟时间;τD为三种分子复合物的平均扩散时间,ω为激光聚焦重叠区的横向半径,N为在三束激光束形成的聚焦重叠区内存在的三种分子复合物的平均数目,三元相关光谱曲线的振幅G(0,0)值与形成的分子复合物数目N值成反比例关系,其值越小,N值越大,反映形成的分子复合物数目越多,说明三种分子间的结合作用力越强。
2.根据权利要求1所述的系统,其特征在于:所述激发光源包括多个激光器,激光器经二色镜或反射镜处理后通过准直耦合器从同一根单模光纤输出。
3.根据权利要求1所述的系统,其特征在于:激发光源发射的激光束依次经过准直扩束镜、二色镜、扫描振镜、扫描镜头和筒镜调节后进入物镜激发样品。
4.根据权利要求3所述的系统,其特征在于:激发产生的荧光信号经物镜汇聚后,经过反射镜、筒镜、扫描镜头、扫描振镜后,经过滤除激发光的二色镜后再分成多路信号;
滤除激发光的二色镜和根据荧光波长分成多路信号的二色镜之间设有一聚光透镜。
5.根据权利要求1所述的系统,其特征在于:样品的荧光信号由至少三个二色镜按照光谱波长分成至少四个检测光路。
6.根据权利要求1所述的系统,其特征在于:检测光路的荧光信号均由对应的聚光透镜汇聚到对应的光纤头,再由对应的多模光纤传输到对应的单光子探测器。
7.根据权利要求1所述的系统,其特征在于:信号采集卡和运算卡与单光子探测器相连接,实时进行三元相关函数运算和实时获得其中三路荧光信号的三元相关光谱曲线。
8.根据权利要求1所述的系统,其特征在于:信号采集卡和运算卡与扫描振镜相连接。
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