[发明专利]精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，属于体外检测技术领域。本发明的精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒包括：链霉亲和素带有Tosyl官能团磁颗粒、化学发光标记物标记的精子顶体酶抗体和偶联标记物标记的精子顶体酶抗体。本发明的精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成对精子顶体酶的检测。这种化学发光免疫分析试剂盒与仪器配套，缩短了临床检测所需的时间。这种化学发光免疫分析试剂盒的检测精度较高。

技术领域

本发明属于体外检测技术领域，具体涉及一种精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

男性不育是指育龄夫妇，未避孕性生活，由于男方因素导致女方在一年内未自然受孕。临床上，普遍应用精液常规检测参数评价男性生育能力。虽然精液常规检测很有意义，但也存在着局限性。为了弥补精液常规检测的不足，人们陆续寻找到一些更有价值的指标，精子顶体酶就是其中的一项。人们发现精子顶体酶与精子浓度、活力、正常形态率等密切相关，对男性不育的诊断与治疗有着重要的应用价值，精子顶体酶阳性率低和活性低是造成男性不育的主要原因。因此，精子顶体酶的检测意义重大。

化学发光免疫分析法，其具有灵敏度高、准确定量、无放射性风险及其样本需求量少等。化学发光免疫测试试剂盒相比传统的检测方法，抗原、抗体的结合是在相似的液体条件下进行，反应更加迅速灵敏；另一方面，化学发光免疫测定试剂盒与化学发光免疫检测仪器组成封闭系统，试剂、样本的添加及检测任务均由仪器自动完成，降低了人为操作的误差，提高了整个系统的灵敏度与准确度。基于此本发明提供一种精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案具体如下：

本发明提供一种精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒，包括：R1、R2和R3试剂；

所述R1试剂为链霉亲和素带有Tosyl官能团磁颗粒；

所述R2试剂为化学发光标记物标记的精子顶体酶抗体；

所述R3试剂为偶联标记物标记的精子顶体酶抗体。

在上述技术方案中，所述R1试剂的质量比是0.02％～1％。

在上述技术方案中，所述R2试剂中，精子顶体酶抗体与化学发光标记物的标记比例是1:3～20；缓冲液为100～500mM Bistris，0.3～1.0M锌化合物，精子顶体酶抗体终浓度为0.1～1μg/mL。

在上述技术方案中，所述R3试剂中，精子顶体酶抗体与偶联标记物的标记比例是1:5～20；缓冲液为100～500mM Bistris，0.3～1.0M锌化合物，精子顶体酶抗体终浓度为0.2～3μg/mL。

在上述技术方案中，所述R1试剂中，磁颗粒的粒径是4～6μm。

在上述技术方案中，所述R2试剂中，化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或者三联吡啶钌。

在上述技术方案中，所述R3试剂中，偶联标记物为生物素或者抗原。

在上述技术方案中，所述锌化合物为硫酸锌、氯化锌或者硫代硫酸锌。

在上述技术方案中，所述化学发光免疫检测试剂盒还包括精子顶体酶校准品，所述精子顶体酶校准品浓度为0.0pg/mL、2.0pg/mL、5.0pg/mL、10.0pg/mL、20.0pg/mL、50.0pg/mL和100.0pg/mL的精子顶体酶蛋白溶液。

本发明还提供一种精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、R1试剂的制备