[发明专利]一种多细胞共培养的三维肝微球模型的构建及应用在审
| 申请号： | 202110566290.6 | 申请日： | 2021-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN113293127A | 公开（公告）日： | 2021-08-24 |
| 发明（设计）人： | 孙秀兰;马孝影;孙嘉笛;徐佳媛;纪剑;张银志 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N5/09;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 黄婵娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 培养 三维 肝微球 模型 构建 应用 | ||
1.一种多细胞共培养的三维模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
将肝实质细胞、肝星形细胞、内皮细胞配制为混合细胞悬浮液；之后将混合细胞悬浮液加入超低吸附孔板，培养1-2天，得到所述的多细胞共培养的三维模型。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的混合细胞悬浮液中肝实质细胞、肝星形细胞以及内皮细胞的数量比为4：1：1。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的肝实质细胞为人肝癌细胞HepG2，肝星形细胞为LX-2，内皮细胞为人脐静脉融合细胞EA.hy926。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述的混合细胞悬浮液中肝实质细胞的浓度为5000cells/mL，肝星形细胞的浓度为1250cells/mL，内皮细胞的浓度为1250cells/mL。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述超低吸附孔板中每孔加入200μL的混合细胞悬浮液。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述的超低吸附孔板为96孔。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述的培养是在37℃下进行培养。
8.权利要求1-7任一项所述的方法构建得到的多细胞共培养的三维模型。
9.权利要求8所述的多细胞共培养的三维模型在肝毒性评价中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的应用是检测黄曲霉毒素B1或T-2毒素。
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