[发明专利]含人GSTP1 ARE的荧光素酶报告基因的细胞株的构建及应用有效

专利信息
申请号: 202110569980.7 申请日: 2021-05-25
公开(公告)号: CN113265423B 公开(公告)日: 2022-08-23
发明(设计)人: 陈田;殷庆飞 申请(专利权)人: 上海家化联合股份有限公司
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12N15/65;C12N15/54;C12N5/10;C12Q1/02
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 张静
地址: 200082 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: gstp1 are 荧光 报告 基因 细胞株 构建 应用
【权利要求书】:

1.一种含人GSTP1 ARE的荧光素酶报告基因的过表达载体,所述过表达载体是SEQ IDNO:2中所示的核苷酸序列。

2.一种稳定表达含人GSTP1 ARE的荧光素酶报告基因的细胞株,其特征在于,所述细胞株的名称为人皮肤致敏物预测细胞株HaCaT-hGSTP1ARE-SV40p-Luc2,保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:C2021113。

3.一种非诊断非治疗目的的评价试剂或产品的皮肤致敏风险的方法,所述方法包括以下步骤:

(a)构建过表达载体pGL4.17-hGSTP1 ARE-SV40p-Luc2,其核苷酸序列为SEQ ID NO:2;

(b)将过表达载体pGL4.17-hGSTP1 ARE-SV40p-Luc2导入HaCaT细胞,构建含人GSTP1ARE的荧光素酶报告基因的细胞株;

(c)采用所述细胞株检测试剂或产品的皮肤致敏风险。

4.如权利要求3所述的方法,其中,所述步骤(b)包括用新霉素进行筛选,获得稳定表达含人GSTP1 ARE的荧光素酶报告基因的细胞株。

5.如权利要求3所述的方法,其中,所述方法还包括在步骤(b)之后筛选对试剂或产品的皮肤致敏风险敏感的细胞株。

6.如权利要求3所述的方法,其中,待检测的试剂或产品选自:化妆品或化妆品原料。

7.如权利要求5或6所述的方法,其中,所述试剂或产品选自:肉桂醛、2,4-二硝基氯苯、溴菌腈、2-巯基苯并噻唑、肉桂醇、水杨酸、N,N-二甲基-1,3-二氨基丙烷或它们的组合。

8.如权利要求2所述的细胞株在非诊断非治疗目的的评价试剂或产品的皮肤致敏风险中的应用。

9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,待检测的试剂或产品选自:化妆品或化妆品原料。

10.如权利要求9所述的应用,其中,所述试剂或产品选自:肉桂醛、2,4-二硝基氯苯、溴菌腈、2-巯基苯并噻唑、肉桂醇、水杨酸、N,N-二甲基-1,3-二氨基丙烷或它们的组合。

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