[发明专利]一种乳酸菌的灭活方法及应用

权利要求书

1.一种乳酸菌的灭活方法，其特征在于：包括以下步骤：

a、将乳酸菌进行高密度发酵培养，使得到的发酵液中乳酸菌的活菌数达到3×10⁹cfu/ml-1×10¹⁰cfu/ml；所述高密度发酵培养的方法为：将所述乳酸菌按照3%-5%的接种体积，接种到装有液体培养基的发酵罐中，在温度为35℃-42℃、pH5-6以及不搅拌的条件下进行发酵，直到发酵液中所述乳酸菌的活菌数达到预期值；

b、在搅拌过程中，将所述发酵液先以0.3-0.4℃/min的速率降温至23℃以下，然后以2.5-3.5℃/min的速率升温至68℃-72℃保温1.5h-2.5h，再以0.8℃/min-1℃/min的速率降温至23℃以下，离心收集菌泥；所述发酵液的pH始终保持在4.5-5.5；

c、将所述菌泥与冻干保护剂混合，然后进行冷冻干燥，得到灭活乳酸菌粉；所述冻干保护剂按质量百分比计由脱脂奶粉1%-10%、海藻糖5%-15%、蔗糖1%-10%、乳糖1%-10%、麦芽糊精5%-15%、甘露醇0.1%-1%和余量的无菌水组成，所述菌泥与所述冻干保护剂的质量比为1:1-5。

2.如权利要求1所述的乳酸菌的灭活方法，其特征在于：所述液体培养基按质量百分比计，包括葡萄糖1%-3%、酵母浸粉1%-4%、磷酸缓冲盐0.1%-1%、乙酸钠0.1%-1%、硫酸镁0.01%-0.1%、吐温800.05%-0.1%和余量的无菌水。

3.如权利要求1所述的乳酸菌的灭活方法，其特征在于：步骤c中，所述菌泥的含水质量为5%-50%。

4.如权利要求1所述的乳酸菌的灭活方法，其特征在于：步骤c中，所述冷冻干燥的条件为：预冻温度为-40℃~-50℃；一次升华温度为1℃~10℃，真空度为0.01mbar~0.05mbar；解析干燥温度为20℃~30℃，真空度为0.001mbar~0.01mbar。

5.如权利要求1所述的乳酸菌的灭活方法，其特征在于：步骤c中，所述乳酸菌粉的含水质量为2%-8%。