[发明专利]膜保护磁固相萃取-高效液相色谱检测牛奶中的雌激素

权利要求书

1.一种用于吸附雌激素的磁性吸附材料，其特征在于，所述材料的制备方法包括如下步骤：

(1)制备氨基修饰的Fe₃O₄粒子：将铁盐分散在乙二醇中，然后加入乙酸钠，溶解混匀后，再加入乙二胺进行反应，反应结束后获得透明溶液；将该透明溶液置于反应容器中，在180-220℃下进行溶剂热反应，反应结束后，冷却，并通过外加磁场进行固液分离，收集固体，即得氨基修饰的Fe₃O₄粒子，记作Fe₃O₄-NH₂；

(2)将所得氨基修饰的Fe₃O₄粒子分散在二氧六环中，配制得到分散液A；将1,3,5-三甲醛基苯TFB分散在二氧六环中，配制得到分散液B；将分散液B加入到分散液A中，获得混合液C，然后滴加乙酸溶液，滴加结束后，置于100-120℃下进行反应；反应结束后，获得初步反应液；

(3)将对苯二胺、1,3,5-三甲醛基苯分散二氧六环中，配制得到分散液D；然后将分散液D加入到初步反应液中，再滴加乙酸溶液，混匀，在100-120℃下进行反应；反应结束后，通过外加磁场进行固液分离，收集固体，即得磁性吸附材料，记作Fe₃O₄@COF-LZU1；

步骤(1)中铁盐相对乙二醇的浓度为40-80mg/mL；乙二胺与铁盐的质量比为8-12：1；乙酸钠与铁盐的质量比为2-5：1；

步骤(2)中混合液C中Fe₃O₄-NH₂纳米粒子与TFB的质量比为2：1；乙酸与Fe₃O₄-NH₂纳米粒子的质量比为1-2：1；

步骤(3)中分散液D中的对苯二胺、1,3,5-三甲醛基苯的质量比为(0.8～1.5)：1；乙酸与对苯二胺的质量比为6-8：1。

2.根据权利要求1所述的磁性吸附材料，其特征在于，步骤(2)中分散液A中Fe₃O₄-NH₂纳米粒子的浓度为15-25mg/mL。

3.根据权利要求1所述的磁性吸附材料，其特征在于，步骤(2)中混合液C中TFB的浓度为50-60mmol/L。

4.根据权利要求1-3任一项所述的磁性吸附材料，步骤(3)中分散液D中的对苯二胺的浓度为10-15mg/mL。

5.一种检测牛奶中雌激素的方法，所述方法包括如下过程：

A、样品处理：将权利要求1-4任一项所述的磁性吸附材料置于透析膜内，并向膜内装满去离子水，获得装有磁性吸附材料分散液的透析膜；然后将装有磁性吸附材料分散液的透析膜置于一系列浓度梯度的已知E1、E2、E3含量的混合标准样品液中，对混合标准样品进行吸附萃取，结束后，收集透析膜内的分散液，并通过外加磁场进行分离，获得固体，洗脱，得到相应样品处理液；

B、检测雌激素：利用HPLC检测所得样品处理液，获得相应的高效液相色谱图；将高效液相色谱图中E1、E2、E3对应的色谱峰面积分别和相应的浓度构建线性关系，得到E1、E2、E3的检测模型；

其中，HPLC检测的条件为：

选择C18 4.6×250mm,5μm色谱柱进行分离，并用荧光检测器FLD进行检测；以乙腈:水，80:20，v:v为流动相，进样体积为10μL，流速为1mL/min，柱温为25℃，激发波长和发射波长分别为280nm和310nm，单个样品检测时长为6min。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤A中所述吸附萃取的条件为：将每含有3mg磁吸附材料的透析膜置于装有20mL样品液中，在50℃下进行萃取10min。