[发明专利]膜保护磁固相萃取-高效液相色谱检测牛奶中的雌激素

说明书

本发明公开了膜保护磁固相萃取‑高效液相色谱检测牛奶中的雌激素，属于检测分析领域。本发明利用在磁性Fe₃O₄纳米球表面原位生长亚胺类共价有机骨架COF‑LZU1，制备得到磁性复合材料Fe₃O₄@COF‑LZU1。本发明将其用作为吸附剂用于膜保护磁固相萃取三种雌激素，通过在特定单体浓度、萃和洗脱条件下对样品进行处理，与HPLC‑FLD联用检测，建立了E1、E2、E3的分析方法。本发明检测方法的样品处理无需有机溶剂，操作简单，吸附剂用量少，可应用于食品样品中E1、E2、E3的富集检测，检测的线性范围宽(0.1～800μg/L)、检出限低(0.01～0.15μg/L)、重复性和重现性好，具有非常好的应用前景。

技术领域

本发明具体涉及膜保护磁固相萃取-高效液相色谱检测牛奶中的雌激素，属于检测分析领域。

背景技术

雌酮(E1)、雌二醇(E2)、雌三醇(E3)是三种典型的内源性雌激素，可由人体及动物自身分泌。这些物质具有促进和维持女性正常生理特征以及促进动物生长、提高日增重量、提高饲料效率等作用。然而，过量的摄入会导致生殖功能障碍、恶性肿瘤、自身免疫性疾病和性早熟等许多其他疾病。有研究表明，畜牧业等非法滥用雌激素会在动物体内积累，从而进入到食物链，危害人类健康。因此，有必要开发食品样品中雌激素的快速、准确检测方法，以便雌激素残留实施有效监控。

E1、E2、E3在食品中的含量通常较低，尤其是牛奶样品，因其基质较为复杂，因此在分析之前，通常使用各种预处理技术对样品中的分析物进行富集。传统的样品预富集方法选择性差，回收率低，难以准确分离和检测牛奶样品中的雌激素。因此，开发吸附性能好、稳定性高的准确分离和检测多种雌激素的方法具有重要意义。

发明内容

本发明通过原位生长策略制备磁性Fe₃O₄@COF-LZU1，用其作为吸附剂，建立了膜保护MSPE法用于萃取牛奶中的痕量雌激素(E1、E2、E3)，并与HPLC-FLD联用检测。所制备的复合材料不但具有COF-LZU1的优异特性，还具有与溶液分离操作简单、快速的特点。此外，利用膜保护技术减少了牛奶样品预处理步骤，无需有机溶剂便能进行萃取，这为复杂基质食品样品中痕量物质的分析提供了一种简单且绿色环保的方法。

本发明的第一个目的是提供一种用于吸附雌激素的磁性吸附材料，所述材料的制备方法包括如下步骤：

(1)制备氨基修饰的Fe₃O₄粒子：将铁盐分散在乙二醇中，然后加入乙酸钠，溶解混匀后，再加入乙二胺进行反应，反应结束后获得透明溶液；将该透明溶液置于反应容器中，在180-220℃下进行溶剂热反应，反应结束后，冷却，并通过外加磁场进行固液分离，收集固体，即得氨基修饰的Fe₃O₄粒子，记作Fe₃O₄-NH₂；

(2)将所得氨基修饰的Fe₃O₄粒子分散在二氧六环中，配制得到分散液A；将1,3,5-三甲醛基苯(TFB)分散在在二氧六环中，配制得到分散液B；将分散液B加入到分散液A中，获得混合液C，然后滴加乙酸溶液，滴加结束后，置于100-120℃下进行反应；反应结束后，获得初步反应液；

(3)将对苯二胺、1,3,5-三甲醛基苯分散二氧六环中，配制得到分散液D；然后将分散液D加入到初步反应液中，再滴加乙酸溶液，混匀，在100-120℃下进行反应；反应结束后，通过外加磁场进行固液分离，收集固体，即得磁性吸附材料，记作Fe₃O₄@COF-LZU1。

在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中铁盐包括氯化铁或其水合物；具体可选FeCl₃·6H₂O。