[发明专利]鸡白痢沙门氏菌和鸡滑液囊支原体双重平板凝集抗原及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种鸡白痢沙门氏菌和鸡滑液囊支原体双重平板凝集抗原及其制备方法和应用，制备方法为分别将鸡白痢沙门氏菌C79‑1和鸡滑液囊支原体GX11‑T复苏传代后制成种子菌液，再接种相应培养基扩大培养，收获，分别经甲醛溶液灭活，浓缩，两种菌液按一定体积配比，加入终浓度为质量分数为3％的结晶紫溶液染色和体积分数为10％的甘油，混匀分装即得。本发明工艺方法简单合理，成本低，稳定性好，制备的双重平板凝集抗原经一次反应同时可检测两种疫病抗体，具有敏感性高，诊断快速，特异性强，凝集效果易于观察等优点，显著节约检测时间和检测费用，临床可用于鸡白痢和鸡滑液支原体两种抗体快速检测，淘汰病鸡，实现疾病净化。

技术领域

本发明涉及兽医诊断技术领域，尤其涉及一种鸡白痢沙门氏菌和鸡滑液囊支原体双重平板凝集抗原，还涉及该双重平板凝集抗原的制备方法和应用。

背景技术

鸡白痢是由沙门氏菌引起的一种严重危害养鸡业发展的细菌性传染病。各品种和日龄鸡均可感染，成年鸡感染后症状轻微，仅表现为一过性生产性能下降，雏鸡受到的危害更严重，发病后，死亡率高。可水平传播，也能垂直传播。雏鸡感染多为种源垂直感染引起，通过定期检测种鸡，淘汰带菌鸡，降低垂直传播风险，实现种源净化，培育无鸡白痢鸡群可显著降低雏鸡发病率。目前，种鸡白痢检测净化主要采用平板凝集试验，全群阳性率不超过0.1％视为合格。

鸡滑液囊支原体是禽支原体中重要的致病性菌之一，在我国分布广泛，传染性强，感染鸡与火鸡后引起滑液囊支原体病。临床表现主要为渗出性关节滑膜炎和腱鞘炎，产蛋下降，传染性强，易与多种病原混合感染，各品种和日龄鸡均可感染。近年来临床发病率增高，给养殖业造成了巨大的经济损失。鸡滑液囊支原体对多种抗生素敏感，对外界抵抗力弱，但易产生耐药性。鸡群感染后，很难彻底清除。一年四季均可发病，冬春季节多发。当前疫苗及药物控制效果不佳。该病可水平传播也能垂直传播。同鸡白痢一样，鸡滑液囊支原体病也可以通过种源传播，通过淘汰阳性鸡只，可切断病原传播途径。最经济实用的阳性鸡筛选方式为平板凝集试验，鸡群通过多次检测实现净化。当前尚无商品化鸡滑液囊支原体病平板凝集诊断抗原，更无鸡白痢沙门氏菌和鸡滑液囊支原体双重平板凝集抗原。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种鸡白痢沙门氏菌和鸡滑液囊支原体双重平板凝集抗原；本发明的目的之二在于提供一种该双重平板凝集抗原的制备方法；本发明的目的之三在于提供一种该双重平板凝集抗原的应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、鸡白痢沙门氏菌和鸡滑液囊支原体双重平板凝集抗原，由鸡白痢沙门氏菌C79-1和鸡滑液囊支原体GX11-T制成，所述鸡白痢沙门氏菌C79-1和鸡滑液囊支原体GX11-T均在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号分别为CVCC 79207、CVCC2960。

本发明优选的，所述鸡白痢沙门氏菌C79-1和鸡滑液囊支原体GX11-T的菌液体积比为2:3。

本发明优选的，所述鸡白痢沙门氏菌C79-1的菌液浓度为1.0×10¹⁰CFU/mL；所述鸡滑液囊支原体GX11-T的菌液浓度为1.0×10¹¹ccu/mL。

2、所述的鸡白痢沙门氏菌和鸡滑液囊支原体双重平板凝集抗原的制备方法，包括以下步骤：

a)制备鸡白痢沙门氏菌C79-1抗原；

b)制备鸡滑液囊支原体GX11-T抗原；

c)将步骤a)中制备的鸡白痢沙门氏菌C79-1抗原和步骤b)中制备的鸡滑液囊支原体抗原按2:3体积配比，加入染色剂，加入保护剂，均质分装保存。

本发明优选的，步骤a)中制备鸡白痢沙门氏菌C79-1抗原的方法为：

(1)将鸡白痢沙门氏菌C79-1菌种经复苏繁殖获得种子菌液；