[发明专利]建立小鼠腹透腹膜损伤模型的方法及BMSCs外泌体的应用有效
| 申请号： | 202110577982.0 | 申请日： | 2021-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN113303280B | 公开（公告）日： | 2022-11-01 |
| 发明（设计）人： | 何娅妮;喻芳;陈客宏;陈佳 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军陆军特色医学中心 |
| 主分类号： | A01K67/02 | 分类号： | A01K67/02;A61K35/12;A61K35/28;A61P29/00;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 重庆鼎慧峰合知识产权代理事务所(普通合伙) 50236 | 代理人： | 龚世妍 |
| 地址： | 400042 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 建立 小鼠 腹膜 损伤 模型 方法 bmscs 外泌体 应用 | ||
1.建立小鼠腹透腹膜损伤模型的方法，其特征在于，所述方法的具体步骤为：将腹膜炎患者透析后的腹透流出液注射到小鼠腹腔内；所述腹透流出液为腹膜炎患者透析后的液体经离心、细菌过滤得到的；腹膜炎患者腹透流出液的纳入标准为：a.首次入院夜间留腹；b.未使用抗生素；c.腹水培养革兰氏阴性杆菌；d.腹水检测白介素-65000pg/ml，降钙素原0.3ng/ml、内毒素0.1EU/mL。
2.根据权利要求1所述建立小鼠腹透腹膜损伤模型的方法，其特征在于，按小鼠体重计，腹腔注射腹膜炎腹透流出液0.1mL/g，每日1次，持续4-6周。
3.BMSCs外泌体在制备腹透腹膜损伤疾病的药物中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述BMSCs外泌体来源于BMSCs细胞培养上清液。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述BMSCs外泌体的制备方法为：取BMSCs细胞培养上清液，2000-3000g 4℃离心30min，取上清；上清经0.22μm滤膜过滤，滤液经100,000-120,000g 4℃超速离心1.5-2h；用相同体积的预冷PBS重悬沉淀，悬液经4℃100,000-120,000g离心1.5-2h；沉淀再用预冷PBS重悬即可。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述BMSCs外泌体的制备方法为：取BMSCs细胞培养上清液，2000g 4℃离心30min，取上清；上清经0.22μm滤膜过滤，滤液经120,000g4℃超速离心2h；用相同体积的预冷PBS重悬沉淀，悬液经4℃120,000g离心2h；沉淀再用预冷PBS重悬即可。
7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述BMSCs外泌体的应用方法为腹腔注射。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，BMSCs外泌体腹腔注射量为按体重计100μg/kg/次。
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