[发明专利]一种治疗痛风药物的指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种治疗痛风药物指纹图谱的建立方法，所述治疗痛风药物由肿节风、虎杖、忍冬藤、车前草、粉萆薢、徐长卿、透骨草、甘草组成，其特征在于，所述建立方法包括采用高效液相色谱法检测所述治疗痛风药物成分，其中，所述高效液相色谱法的条件包括：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充材料，COSMOSILC18，5μm，2.5×460mm；

流动相：流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.1%的磷酸水溶液，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱程序如下，其中流动相比例均为体积百分比：

0～2min，流动相A为3%，流动相B为97%；

2～6min，流动相A为3%～7%，流动相B为97%～93%；

6～30min，流动相A为7%～10%，流动相B为93%～90%；

30～46min，流动相A为10%～15%，流动相B为90%～85%；

46～89min，流动相A为15%～22%，流动相B为85%～78%；

89～95min，流动相A为22%～27%，流动相B为78%～73%；

95～125min，流动相A为27%～80%，流动相B为73%～20%；

125～128min，流动相A为80%～3%，流动相B为20%～97%；

128～135min，流动相A为3%，流动相B为97%；

所述高效液相色谱法的条件还包括：

流速：1.0mL/min；柱温：40℃；

检测波长：320nm；

理论塔板数按虎杖苷峰计算，应不低于6000；并且

所述高效液相色谱法检测所述治疗痛风药物成分包括以下步骤：

（1）制备对照品溶液：分别称取绿原酸1.72mg、迷迭香酸4.07mg、异嗪皮啶4.24mg及虎杖苷4.20mg，将称取的绿原酸、迷迭香酸、异嗪皮啶及虎杖苷置于50ml容量瓶中，再加甲醇溶解并稀释至刻度，作为混合对照品溶液；

（2）制备供试品溶液：取所述治疗痛风药物0.5～1.0g，置于锥形瓶中，加入甲醇18～22ml，称重，超声处理0.8～1.2h，放冷，用甲醇补足失重，滤过，取续滤液即得；

（3）测定：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl注入高效液相色谱仪，根据所述高效液相色谱法的色谱条件进行测定，得到指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的一种治疗痛风药物指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤（2）中取所述治疗痛风药物0.8g，置于锥形瓶中，加入甲醇20ml，称重，超声处理1h，放冷，用甲醇补足失重，滤过，取续滤液即得。

3.根据权利要求1所述的一种治疗痛风药物指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤（2）中超声处理时，超声波振荡发生器超声频率为35～40KHz。

4.根据权利要求3所述的一种治疗痛风药物指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤（2）中超声处理时，超声波振荡发生器超声频率为38KHz。