[发明专利]一种非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒在审
| 申请号： | 202110579404.0 | 申请日： | 2021-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN114088940A | 公开（公告）日： | 2022-02-25 |
| 发明（设计）人： | 吴海龙;赵林萍;付燕峰;曾小宇;李慧英;娄亚坤;常伟;任宝红 | 申请（专利权）人： | 郑州中道生物技术有限公司;河南国昌生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 郑州豫乾知识产权代理事务所(普通合伙) 41161 | 代理人： | 李保平 |
| 地址： | 450000 河南省郑州市市辖区高新技术产业开发区长椿*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 非洲 猪瘟 病毒 elisa 抗体 检测 试剂盒 | ||
1.一种非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括包被有抗原的酶标板，所述抗原为原核表达的非洲猪瘟病毒p72、p30和p54蛋白。
2.如权利要求1所述的非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒p72、p30和p54蛋白的质量比为1:1:1。
3.如权利要求2所述的非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，包被有抗原的酶标板的制备方法，包括以下步骤：用包被液将抗原稀释，酶标板每孔中抗原包被量10ng，封板，于2-8℃下，包被16-24h，洗涤酶标板，除水分，加入封闭液，封闭、干燥，得包被有抗原的酶标板。
4.如权利要求3所述的非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括样品稀释液、洗涤液、显色液、酶标记结合物、终止液、非洲猪瘟病毒阳性猪血清对照和非洲猪瘟病毒阴性猪血清对照。
5.如权利要求4所述的非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述包被液为pH9.6的碳酸盐缓冲液，所述封闭液为含3%BSA的磷酸盐缓冲液，酶标记结合物为酶标羊抗猪二抗。
6.如权利要求5所述的非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述样品稀释液的配制：取氯化钠8g、磷酸氢二钠2.9g、磷酸二氢钾0.24g、氯化钾0.2g、纯化水600ml、Proclin-300 1ml、新生牛血清200ml，混合，补加纯化水定容至1000ml；洗涤液的配制：氯化钠8g、磷酸氢二钠2.9g、磷酸二氢钾0.24g、氯化钾0.2g、吐温20 0.5ml、纯化水400-800ml，混合，补加纯化水定容至1000ml；显色液包括显色剂A液和显色剂B液。
7.如权利要求6所述的非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述显色剂A液的配制：取磷酸氢二钠14.7g、柠檬酸9.3g、过氧化脲0.3g，溶于400-800ml纯化水，混合，补加纯化水定容至1000ml；显色剂B液的配制：取四甲基联苯二胺0.2g、无水乙醇10ml、400-800ml纯化水，混合，补加纯化水定容至1000ml。
8.如权利要求7所述的非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述终止液为2M的H2SO4。
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