[发明专利]施旺细胞的制备方法及应用有效
申请号: | 202110580788.8 | 申请日: | 2021-05-26 |
公开(公告)号: | CN113322235B | 公开(公告)日: | 2022-12-16 |
发明(设计)人: | 何敏仪;吴海涛;沈政;谢丽君;何海娜 | 申请(专利权)人: | 北昊干细胞与再生医学研究院有限公司;广州优得清生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/12;C12N15/861 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 戴志攀 |
地址: | 510630 广东省广州市黄埔区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 制备 方法 应用 | ||
1.一种施旺细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
获取干细胞,所述干细胞为脂肪源性间充质干细胞;
提高所述干细胞中缝隙连接蛋白43的表达量:将缝隙连接蛋白43基因与穿梭载体连接并线性化,然后与腺病毒载体共转化感受态细胞,筛选提取得到含有缝隙连接蛋白43基因的腺病毒载体,使用所述含有缝隙连接蛋白43基因的腺病毒载体转染所述干细胞;
诱导培养缝隙连接蛋白43的表达量提高后的所述干细胞分化为施旺细胞。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,诱导所述干细胞分化为施旺细胞的方法包括以下步骤:将所述干细胞铺板24小时后,于含有1 mmol/L β-巯基乙醇的DMEM/F12培养液中培养24小时,然后于含有35ng/mL反式维甲酸的DMEM/F12培养液中培养24小时,再于施旺细胞培养基中培养7天;
所述施旺细胞培养基为含10wt%无动物源成分血清替代品、5ng/mL PDGF-AA、10ng/mLbFGF、200ng/mL heregulin和5μmol/L forskolin的DMEM/F12培养液。
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