[发明专利]施旺细胞的制备方法及应用有效

专利信息
申请号: 202110580788.8 申请日: 2021-05-26
公开(公告)号: CN113322235B 公开(公告)日: 2022-12-16
发明(设计)人: 何敏仪;吴海涛;沈政;谢丽君;何海娜 申请(专利权)人: 北昊干细胞与再生医学研究院有限公司;广州优得清生物科技有限公司
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N15/12;C12N15/861
代理公司: 华进联合专利商标代理有限公司 44224 代理人: 戴志攀
地址: 510630 广东省广州市黄埔区*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 细胞 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种施旺细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

获取干细胞,所述干细胞为脂肪源性间充质干细胞;

提高所述干细胞中缝隙连接蛋白43的表达量:将缝隙连接蛋白43基因与穿梭载体连接并线性化,然后与腺病毒载体共转化感受态细胞,筛选提取得到含有缝隙连接蛋白43基因的腺病毒载体,使用所述含有缝隙连接蛋白43基因的腺病毒载体转染所述干细胞;

诱导培养缝隙连接蛋白43的表达量提高后的所述干细胞分化为施旺细胞。

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,诱导所述干细胞分化为施旺细胞的方法包括以下步骤:将所述干细胞铺板24小时后,于含有1 mmol/L β-巯基乙醇的DMEM/F12培养液中培养24小时,然后于含有35ng/mL反式维甲酸的DMEM/F12培养液中培养24小时,再于施旺细胞培养基中培养7天;

所述施旺细胞培养基为含10wt%无动物源成分血清替代品、5ng/mL PDGF-AA、10ng/mLbFGF、200ng/mL heregulin和5μmol/L forskolin的DMEM/F12培养液。

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