[发明专利]一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体的载体制备方法在审
| 申请号： | 202110583863.6 | 申请日： | 2021-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN113122571A | 公开（公告）日： | 2021-07-16 |
| 发明（设计）人： | 金双侠;张献龙;周家伟;扶春阳 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/60 |
| 代理公司： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人： | 张国栋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 新型 crispr cas9 基因 编辑 载体 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体，包括CRISPR/Cas9载体p7N-EC。
2.一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体的载体制备方法，其特征在于，所述CRISPR/Cas9载体p7N-EC通过下列步骤制备获得：
(1)获得目的序列EC1.2en-1.1p，具体地，该目的序列通过以下步骤制备获得：
1)先获得含有目的序列EC1.2en-1.1p的载体pHEE401E-ccdB；
2)以pHEE401E-ccdB载体为模板，利用Primer5软件设计引物，通过PCR扩增获得EC1.2en-1.1p目的序列；
(2)利用Sbf Ⅰ、BstB Ⅰ两种酶对pRGEB32-GhU6.7-NPT Ⅱ载体进行双酶切去除Ubiquitin启动子得到线性载体，然后与步骤(1)中获得的EC1.2en-1.1p目的序列进行In-fusion连接，通过测序验证，得到适用于棉花的新型基因编辑载体。
3.根据权利要求1或2所述的一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体的载体制备方法，其特征在于，所述载体p7N-EC在棉花基因组编辑中的应用。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华中农业大学，未经华中农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110583863.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
