[发明专利]膨腹海马性别鉴定SNP位点及性别鉴定方法有效

专利信息
申请号: 202110584877.X 申请日: 2021-05-27
公开(公告)号: CN113322330B 公开(公告)日: 2022-07-19
发明(设计)人: 何丽斌;郑乐云;黄镇;陈欣欣;林金波;邱峰岩 申请(专利权)人: 福建省水产研究所(福建水产病害防治中心)
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12N15/11
代理公司: 厦门原创专利事务所(普通合伙) 35101 代理人: 魏思凡
地址: 361000 福*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 海马 性别 鉴定 snp 方法
【权利要求书】:

1.一种膨腹海马性别鉴定SNP分子标记,其特征在于,所述SNP分子标记所在的碱基序列为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5。

2.一种膨腹海马性别鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤,

S1,提取膨腹海马DNA;

S2,以提取的DNA为模板,进行PCR反应,扩增序列SEQ ID No.1-SEQ ID No.5,序列SEQID No.1-SEQ ID No.5对应的PCR引物依次为SEQ ID No.6-SEQ ID No.15所示;

S3,将PCR产物进行测序验证,并根据所述PCR产物判断膨腹海马的雌雄;若SNP位点为杂合型,则为雄性,若SNP位点为纯合型,则为雌性。

3.根据权利要求2所述的膨腹海马性别鉴定方法,其特征在于,步骤S1的具体为:提取膨腹海马分泌物,采用CTAB法提取膨腹海马基因组DNA。

4.根据权利要求2所述的膨腹海马性别鉴定方法,其特征在于,所述PCR反应的反应体系为:2×Taq PCR MaterMix 1.0μL、DNA模板 1.0 µL、浓度10 μM的引物F 0.4 µL、浓度为10 μM的引物R 0.4 µL和水2 µL。

5.根据权利要求2所述的膨腹海马性别鉴定方法,其特征在于,所述PCR反应的程序为:95℃变性4 min;94℃变性30 s,55℃退火45 s,72℃延伸45 s,循环次数为40次;72℃延伸10 min,16℃保存。

6.一种膨腹海马性别鉴定试剂盒,其特征在于,包括膨腹海马DNA提取试剂盒,序列SEQID No.1-SEQ ID No.5对应的PCR引物,2×Taq PCR MaterMix,所述PCR引物的序列如SEQID No.6-SEQ ID No.15所示。

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