[发明专利]膨腹海马性别鉴定SNP位点及性别鉴定方法有效
申请号: | 202110584877.X | 申请日: | 2021-05-27 |
公开(公告)号: | CN113322330B | 公开(公告)日: | 2022-07-19 |
发明(设计)人: | 何丽斌;郑乐云;黄镇;陈欣欣;林金波;邱峰岩 | 申请(专利权)人: | 福建省水产研究所(福建水产病害防治中心) |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12N15/11 |
代理公司: | 厦门原创专利事务所(普通合伙) 35101 | 代理人: | 魏思凡 |
地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 海马 性别 鉴定 snp 方法 | ||
1.一种膨腹海马性别鉴定SNP分子标记,其特征在于,所述SNP分子标记所在的碱基序列为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5。
2.一种膨腹海马性别鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤,
S1,提取膨腹海马DNA;
S2,以提取的DNA为模板,进行PCR反应,扩增序列SEQ ID No.1-SEQ ID No.5,序列SEQID No.1-SEQ ID No.5对应的PCR引物依次为SEQ ID No.6-SEQ ID No.15所示;
S3,将PCR产物进行测序验证,并根据所述PCR产物判断膨腹海马的雌雄;若SNP位点为杂合型,则为雄性,若SNP位点为纯合型,则为雌性。
3.根据权利要求2所述的膨腹海马性别鉴定方法,其特征在于,步骤S1的具体为:提取膨腹海马分泌物,采用CTAB法提取膨腹海马基因组DNA。
4.根据权利要求2所述的膨腹海马性别鉴定方法,其特征在于,所述PCR反应的反应体系为:2×Taq PCR MaterMix 1.0μL、DNA模板 1.0 µL、浓度10 μM的引物F 0.4 µL、浓度为10 μM的引物R 0.4 µL和水2 µL。
5.根据权利要求2所述的膨腹海马性别鉴定方法,其特征在于,所述PCR反应的程序为:95℃变性4 min;94℃变性30 s,55℃退火45 s,72℃延伸45 s,循环次数为40次;72℃延伸10 min,16℃保存。
6.一种膨腹海马性别鉴定试剂盒,其特征在于,包括膨腹海马DNA提取试剂盒,序列SEQID No.1-SEQ ID No.5对应的PCR引物,2×Taq PCR MaterMix,所述PCR引物的序列如SEQID No.6-SEQ ID No.15所示。
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